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冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲“智得”培殖

時(shí)間:2023-05-01 12:43:52 資料 我要投稿
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冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲“智得”培殖

冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲“智得”固體培殖

冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲“智得”培殖

——王永銓

泉州市智得冬蟲(chóng)夏草真菌開(kāi)發(fā)有限公司憑借著廈門(mén)市海滄區(qū)人民政府為促進(jìn)臺(tái)灣和大陸兩岸關(guān)系的和平發(fā)展,找準(zhǔn)定位、謀劃發(fā)展,弘揚(yáng)傳承位于海滄區(qū)的青礁慈濟(jì)宮保生大帝吳夲真人慈悲濟(jì)世精神,創(chuàng)建的國(guó)家級(jí)高新技術(shù)創(chuàng)業(yè)中心海滄生物醫(yī)藥孵化園區(qū)的優(yōu)越投資環(huán)境,其良好的空間很適合于“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體項(xiàng)目的研發(fā),泉州“智得”毅然投資組建廈門(mén)市貝康捷生物科技有限公司,當(dāng)即受到了當(dāng)?shù)卣嚓P(guān)部門(mén)的重視與支持。

隨著中國(guó)生物科學(xué)家們對(duì)于冬蟲(chóng)夏草真菌有性型的整株繁育與人工無(wú)性型培殖其菌絲體研究的深入,冬蟲(chóng)夏草真菌的有效營(yíng)養(yǎng)成分被確定是蝙蝠蛾被毛孢菌絲體。也才有了泉州市智得冬蟲(chóng)夏草真菌開(kāi)發(fā)有限公司、廈門(mén)市貝康捷生物科技有限公司和香港同仁堂生物科技研發(fā)有限公司三家科研人員共同合作專注于“智得”牌冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體的無(wú)性型固體培殖研究。

再就是,生物科學(xué)家們從天然野生的冬蟲(chóng)夏草上分離的菌種越來(lái)越多,如何確定這些菌種與天然野生的冬蟲(chóng)夏草的關(guān)系就成為一個(gè)極為重要的課題。由于,國(guó)內(nèi)外的研究人員采用的分離方法和分離培養(yǎng)的條件等不盡相同,其所獲得的分離物就必然產(chǎn)生差異。

國(guó)內(nèi)報(bào)道與冬蟲(chóng)夏草有關(guān)的菌種就達(dá)10個(gè)屬的30多種。曾報(bào)道的無(wú)性型主要有蟲(chóng)草多毛孢Hirsutella hepiti、中國(guó)被毛孢Hirsutella sinensis、蝙蝠蛾擬青霉Paecilomyces hepiali、中國(guó)擬青霉Paecilomyces sinesis、蝙蝠蛾被孢霉Mortierella hepiali、蟲(chóng)草頭孢霉Cephdosporium sinensis、蝙蝠蛾柱霉Scytalidium hepiale、中國(guó)彎頸霉Tolypocladium sinensis、中國(guó)金孢霉Chrysosporium sinensis、葡萄穗霉屬(Stachybotry)等等,但這幾個(gè)菌種中中國(guó)擬青霉和蝙蝠蛾被孢霉經(jīng)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)不可能是冬蟲(chóng)夏草的無(wú)性型。面對(duì)如此眾多的菌種和名稱,就引發(fā)了關(guān)于冬蟲(chóng)夏草無(wú)性型的標(biāo)準(zhǔn)、無(wú)性型的種類以及如何確定冬蟲(chóng)夏草的無(wú)性型等問(wèn)題的爭(zhēng)議。 “智得”人視責(zé)任高于一切,質(zhì)量就是生命。為保證冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體產(chǎn)品使用的安全可靠!爸堑谩彬鸲瓯幻呔z體從研發(fā)階段初期就充分注意到冬蟲(chóng)夏草無(wú)性型培殖的復(fù)雜性,“智得”科研人員就在總結(jié)前人上千篇的參考文獻(xiàn)以及國(guó)家衛(wèi)生部、食品藥品監(jiān)督管理局頒布的相關(guān)法規(guī)文件,從一開(kāi)始就將“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌保健食品的菌種定位在蝙蝠蛾被毛孢(即中國(guó)被毛孢Hirsutella sinensis)。

為了確保其投產(chǎn)后使用菌株的安全可靠性,其所選用的菌種都是來(lái)源于每年五月中旬要親自去青藏高原采集新鮮的天然野生冬蟲(chóng)夏草,經(jīng)人工分離、提純,初步判斷后,再經(jīng)過(guò)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所鑒定,被確認(rèn)為蝙蝠蛾被毛孢(中國(guó)被毛孢Hirsutella sinensis)后,并通過(guò)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心(北京)營(yíng)養(yǎng)與食品安全所再對(duì)蝙蝠蛾被毛孢(中國(guó)被毛孢Hirsutella sinensis)菌種毒力試驗(yàn)確認(rèn)安全,才再進(jìn)行后繼的工作。

所以,只有經(jīng)過(guò)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所嚴(yán)格驗(yàn)證的無(wú)性型菌種才能稱為冬蟲(chóng)夏草的無(wú)性型。

在這里有必要再向讀者介紹什么是冬蟲(chóng)夏草真菌菌絲體?

食用真菌在野生狀態(tài)下一般都寄生在肥沃腐爛的土壤里、枯死的樹(shù)木上或昆蟲(chóng)類動(dòng)物體內(nèi),生物科學(xué)家就把這些肥沃腐爛的土壤、枯死的樹(shù)木或昆蟲(chóng)類動(dòng)物體稱為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。于是就在這些營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)中生長(zhǎng)著很多非常細(xì)的管狀細(xì)絲,這些細(xì)絲要生長(zhǎng)、伸長(zhǎng)、分枝形成許許多多的細(xì)絲,就稱為菌絲體。

野生的食用菌菌絲體的主要功能是從死亡的有機(jī)質(zhì)中分解、吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)養(yǎng)分,用以滿足

菌絲繁殖和子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的需要。因此,在高等食用真菌的人工培養(yǎng)生產(chǎn)中,菌絲體要得到充分的生長(zhǎng)就需要獲得豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ)。

冬蟲(chóng)夏草真菌 (蝙蝠蛾被毛孢)和食用菌蘑菇、藥用菌靈芝一樣,都是屬于高等真菌,被冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)感染的蝙蝠蛾幼蟲(chóng)就相當(dāng)于人工培養(yǎng)蘑菇的麥麩、棉子殼、木屑和糖等合成的培養(yǎng)基,相當(dāng)于培養(yǎng)靈芝的椴木。

蘑菇與靈芝是寄生在死亡的植物上,而冬蟲(chóng)夏草真菌只能寄生在高原雪域活生生的蝙蝠蛾蟲(chóng)體上,它和蘑菇、靈芝都是從死亡的有機(jī)質(zhì)中分解、吸收營(yíng)養(yǎng),用以滿足其菌絲繁殖和子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的需要。蘑菇與靈芝的食用部位是地面上的

子實(shí)體,而冬蟲(chóng)夏草是從死亡的有機(jī)質(zhì)中分解、吸收營(yíng)養(yǎng),用以滿足其菌絲繁殖和子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的需要。蘑菇與靈芝的食用部位是地面上的子實(shí)體,而冬蟲(chóng)夏草真菌的食用部位不僅指地上的草(子座),生物學(xué)名稱為:被毛孢真菌;還包括地下蝙蝠蛾蟲(chóng)體菌

絲核(培養(yǎng)基),全稱:蝙蝠蛾被毛孢,因?yàn)椋挥兄袊?guó)才有,才稱:中國(guó)被毛孢,用以區(qū)別印度、尼泊爾等國(guó)外蟲(chóng)草菌。

天然野生的全株冬蟲(chóng)夏草有性繁殖的有效成分就是冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體。于是,才有人將冬蟲(chóng)夏草戲稱為雪山上的“蘑菇” 。

生物科學(xué)家們觀察到高等真菌的菌絲體有四種作用:

一是對(duì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)具有分解和吸收作用;

二是對(duì)分解吸收后的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)具有運(yùn)輸作用;

三是對(duì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)具有貯藏作用;

四是具有無(wú)性繁殖作用。

“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體進(jìn)行人工固體培養(yǎng)繁殖,使用的菌種就是利用冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體具有的無(wú)性繁殖作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。而人工培養(yǎng)冬蟲(chóng)夏草真菌其有效成分菌絲體也正是因?yàn)槎x(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體所具備的這四種作用才能夠得以成功實(shí)現(xiàn)。

通過(guò)本文前面的敘述讓讀者知道了:

冬蟲(chóng)夏草的有效營(yíng)養(yǎng)成分——菌絲體原本是冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)寄生在蝙蝠蛾幼蟲(chóng)蟲(chóng)體內(nèi),吸收蟲(chóng)體的營(yíng)養(yǎng)精華生長(zhǎng)而成的,也就是有性型天然野生整株冬蟲(chóng)夏草的生成。它與人工培養(yǎng)出的冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體都是由冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)在不同的寄主物、生長(zhǎng)階段表現(xiàn)的兩種形態(tài):天然野生的冬蟲(chóng)夏草是其寄主冬蟲(chóng)夏草真菌在蝙蝠蛾幼蟲(chóng)體而形成的蟲(chóng)、菌復(fù)合體,是有性階段成熟后的形態(tài)即全株冬蟲(chóng)夏草;而人工培養(yǎng)冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體是其寄生在人工配制的營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上,人為地控制獲取菌絲體,是無(wú)性階段的形態(tài),可以看作是冬蟲(chóng)夏草有效營(yíng)養(yǎng)成分的提取物。

人工培育冬蟲(chóng)夏草不論采用的是液體深層發(fā)酵生產(chǎn)或固體培養(yǎng)繁殖,其目標(biāo)都是要獲取冬蟲(chóng)夏草真菌有效營(yíng)養(yǎng)成分—菌絲體,而不是全株冬蟲(chóng)夏草。

有性型天然野生冬蟲(chóng)夏草真菌和無(wú)性型人工培育冬蟲(chóng)夏草菌絲體,兩者是同一種冬蟲(chóng)夏草真菌菌種(蝙蝠蛾被毛孢)的兩種不同生長(zhǎng)形態(tài)。

兩者相同之處:

1、菌種相同:冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)必須是分離于青藏高原天然野生的冬蟲(chóng)夏草。在生物界、檢驗(yàn)菌種真?zhèn)喂J(rèn)的方法是“生物還原法”:將分離的菌種在產(chǎn)地接種蝙蝠蛾幼蟲(chóng)體或在實(shí)驗(yàn)室人工離體培養(yǎng),使之生長(zhǎng)出含子囊孢子的子座,是準(zhǔn)確無(wú)誤檢測(cè)該菌種是否是冬蟲(chóng)夏草無(wú)性階段的最好辦法。冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)既可以在蝙蝠蛾幼蟲(chóng)體上接種成功,長(zhǎng)出全株冬蟲(chóng)夏草;同樣也可以在人工滅菌培養(yǎng)基上完成從菌絲菌落、子

座、子囊果、子囊孢子完整的發(fā)育周期長(zhǎng)出與冬蟲(chóng)夏草一模一樣的子座,才能夠證實(shí)此“被毛孢”是真正的冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢。

2、生長(zhǎng)環(huán)境相同:天然野生的冬蟲(chóng)夏草適宜生長(zhǎng)溫度為青藏高原雪線以上,冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)適宜生長(zhǎng)溫度也要在高原雪線以上,因此冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體的人工培養(yǎng)環(huán)境必須模擬青藏高原雪域低溫稀氧環(huán)境,否則就生長(zhǎng)不出菌絲體。

3、成份基本一致:“智得”牌固體培養(yǎng)繁殖的蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉經(jīng)譜尼(北京)檢測(cè)中心檢測(cè)的數(shù)據(jù)與某液體發(fā)酵菌絲粉、天然野生冬蟲(chóng)夏草粉的數(shù)據(jù)作比對(duì)。

經(jīng)過(guò)以上科學(xué)數(shù)據(jù)的比對(duì),足以證明“智得”固體培養(yǎng)繁殖的蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉質(zhì)量已經(jīng)優(yōu)越于天然野生冬蟲(chóng)夏草。就像今天的人們已經(jīng)極少有人能夠吃到天然野生的五谷雜糧、瓜果蔬菜一樣,市場(chǎng)上供應(yīng)的基本上都是經(jīng)過(guò)人工雜交培育而成的。人工培育的物種必然超過(guò)天然野生的物種這是科技不斷創(chuàng)新的結(jié)果,“智得”人工固體培養(yǎng)繁殖成功蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉也是同樣的道理。

2005年10月29日中國(guó)生物界的專家院士為了保護(hù)只有生長(zhǎng)在中國(guó)青藏高原的冬蟲(chóng)夏草真菌這一知識(shí)產(chǎn)權(quán),他們一致在北京簽名確認(rèn):冬蟲(chóng)夏草無(wú)性型菌種就是中國(guó)被毛孢(蝙蝠蛾被毛孢Hirsutella sinensis)。

由此可見(jiàn):一貫堅(jiān)持采用純正的蝙蝠蛾被毛孢菌種進(jìn)行人工固體培養(yǎng)繁殖的“智得”蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉保健食品也就是天然野生冬蟲(chóng)夏草最為理想的換代產(chǎn)品。

“智得”蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉保健食品的問(wèn)世,是我國(guó)珍稀中藥材人工制取研究開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)的重大突破,其科技含量高,用途廣泛。不僅可以做為保健食品的原料,也可以用于生物、植物藥的復(fù)方研究和開(kāi)發(fā),為冬蟲(chóng)夏草的人工綜合開(kāi)發(fā)利用提供了充足質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的原料,它進(jìn)一步地滿足了市場(chǎng)需求,可以減少天然野生冬蟲(chóng)夏草的采挖量。同時(shí),又保護(hù)了珍稀的冬蟲(chóng)夏草資源和產(chǎn)區(qū)生態(tài),實(shí)現(xiàn)了開(kāi)發(fā)與環(huán)保的和諧統(tǒng)一。

為確保純正冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體生物量的得率質(zhì)量,“智得”人工固體培養(yǎng)繁殖冬蟲(chóng)夏草真菌菌絲體歷經(jīng)反復(fù)不懼失敗的實(shí)驗(yàn),投入大量的物力和精力才得以設(shè)制出培養(yǎng)時(shí)間表、固體培養(yǎng)基水份含量、PH緩沖劑,以及適時(shí)地更新相關(guān)的工藝裝置來(lái)改善和消除菌絲體黑色代謝物,才有今日的可喜收獲。

由于,天然野生的冬蟲(chóng)夏草真菌生長(zhǎng)條件十分苛刻,單靠青藏高原的自然條件是很難滿足其生活要求,以至才會(huì)有冬蟲(chóng)夏草質(zhì)量的級(jí)別好壞。而“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲在人工固體精心培育過(guò)程中,完全可以做到冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)所需的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)足量供給。天然野生的冬蟲(chóng)夏草不僅外型不一、內(nèi)在品質(zhì)也是相差顯殊,并含有雜質(zhì)。而人工固體培養(yǎng)繁殖冬蟲(chóng)夏草真菌菌絲體是在極為優(yōu)越的低溫稀氧環(huán)境下完成的生長(zhǎng)過(guò)程,其菌絲體的各項(xiàng)內(nèi)在指標(biāo)(藥食兩用價(jià)值)才會(huì)高于天然野生的冬蟲(chóng)夏草。

請(qǐng)看“智得”固體繁殖蝙蝠蛾被毛孢菌絲體過(guò)程系列圖片:

1)位于優(yōu)越的廈門(mén)海滄國(guó)家級(jí)科技創(chuàng)業(yè)中心生物醫(yī)藥孵化園區(qū)的“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體培殖基地←

2)、“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌菌種均采自青藏高原天然野生冬蟲(chóng)夏草→

3)、“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌菌種細(xì)心采挖→

4)、“智得”采集的冬蟲(chóng)夏草真菌菌種全是 珍稀、天然、地道的冬蟲(chóng)夏草↑

5)、“智得”研究人員在專心分離冬蟲(chóng)夏草真菌菌株→

6)“智得”精深培育復(fù)壯的CN-88號(hào)冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌種→

7)、“智得”培殖冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體特制營(yíng)養(yǎng)液↓

9)、“智得”固體培殖的高純度冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體。 ←

10)、“智得”固體培殖冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體潔凈接種室 ↙

11)、菌種儲(chǔ)藏室和菌種液氮保存罐 ↓

12、“智得”固體培殖蝙蝠蛾被毛孢菌絲體和天然野生冬蟲(chóng)夏草菌絲體實(shí)物比對(duì):

13、“智得”采用固體培養(yǎng)繁殖工藝與液體深層發(fā)酵的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體相比的優(yōu)勢(shì):

A、具有菌絲得率高,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)目前規(guī);后w發(fā)酵菌絲得率1-3%。

B、和天然野生的冬蟲(chóng)夏草真菌繁殖菌絲體一樣,蝙蝠蛾被毛孢的營(yíng)養(yǎng)成分菌絲體的代謝產(chǎn)物全部得到保留,不會(huì)像液體發(fā)酵工藝隨著發(fā)酵液排放而遭流失,以致服用“智得”菌絲粉的效果普遍反映良好

C、不存在發(fā)酵醪液排放對(duì)環(huán)境造成污染;

D、投資少,成本低,見(jiàn)效快,讓高貴保健食品進(jìn)入平民家庭,百姓分享生物科技成果變成可能。

14、“智得”研發(fā)固體培養(yǎng)繁殖純正冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體項(xiàng)目已擁有全套成熟的工藝技術(shù),經(jīng)過(guò)福建省科學(xué)技術(shù)研究所(編號(hào):CN2009FJQZ007)和國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利檢索咨詢中心(編號(hào):G111532)進(jìn)行多方面的查新實(shí)屬國(guó)際和國(guó)內(nèi)創(chuàng)新,為人工培育冬蟲(chóng)夏草工業(yè)化生產(chǎn)開(kāi)創(chuàng)出又一新天地。

15、在國(guó)務(wù)院發(fā)展研究中心縣域經(jīng)濟(jì)專家委員會(huì)王海安秘書(shū)長(zhǎng)的幫助之下,王永銓先生就固體培養(yǎng)繁殖冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體遇到的的三大生產(chǎn)瓶頸問(wèn)題(一是固體繁育冬蟲(chóng)夏草菌絲體的菌種因交叉感染慨率大導(dǎo)致菌種可循環(huán)使用次數(shù)少而成本皍貴;二是固體繁育工藝的恒溫用電既需“大馬拉車”、又因擺脫不掉泄能弊病而造成投資與生產(chǎn)成本均太高;三是為保障冬蟲(chóng)夏草菌絲體的營(yíng)養(yǎng)而必須限止干燥溫度不得超過(guò)巴氏溫度70℃存在易變質(zhì)的隱患)請(qǐng)教了專家委員會(huì)首席專家、當(dāng)代狀元孔德凱教授,孔德凱教授即與王永銓先生共同合作研發(fā)出了一種無(wú)風(fēng)機(jī)無(wú)壓縮機(jī)無(wú)氟的靜音恒溫繁育箱,將原集約化固體繁育冬蟲(chóng)夏草菌絲體的工藝改為箱體繁育法,利用分開(kāi)時(shí)差接種或采收可徹底避免菌種感染,其可將農(nóng)忙式集中操作工藝分解為休閑式日均操作工藝,大大降低了勞動(dòng)強(qiáng)度和提髙了勞動(dòng)效率,還可因恒溫繁育箱的交叉耗電特色而實(shí)現(xiàn)“一馬拉多車”, 該恒溫繁育箱還因電耗小而可采用低壓電工作使遇到突然仃電時(shí)可類似應(yīng)急燈一樣自動(dòng)切換成電瓶供電而保障避免損失,還可方便移動(dòng)到無(wú)菌室接種或采收,這種恒溫繁育箱還可用于節(jié)電冷保鮮或 “集波”干燥,對(duì)其干燥過(guò)的“智得”冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉測(cè)得氨基酸和活性酶的成活率提高了五倍及滅菌率達(dá)到100%。再經(jīng)北京樂(lè)活生物科技有限公司量子醫(yī)學(xué)工作室采用最先進(jìn)的國(guó)際量子技術(shù)分析,“智得”干燥過(guò)的菌絲粉在提髙人體免疫功能效價(jià)超過(guò)天然野生冬蟲(chóng)夏草粉的1.18倍,對(duì)治療高血糖、糖尿病、肝臟、胰島、胰腺的功能效價(jià)分別提高了2~5倍。

這一瓶頸問(wèn)題的突破可為解決冬蟲(chóng)夏草供不應(yīng)求以至貴比黃金的矛盾、為規(guī);a(chǎn)髙品質(zhì)的冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體,進(jìn)而為拉動(dòng)中國(guó)健康養(yǎng)生藥膳的發(fā)展、實(shí)現(xiàn)普及人體免度力革命開(kāi)創(chuàng)了新前景??。

16、“智得”蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉膠囊采用的原料“蝙蝠蛾被毛孢菌絲體”和天然野生的冬蟲(chóng)夏草一樣的含有腺苷成分,是具有生物活性的物質(zhì),也是產(chǎn)品質(zhì)量控制的主要指標(biāo),由于檢測(cè)方法成熟,有利于產(chǎn)品質(zhì)量的控制。因此,《智得》蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉的標(biāo)志性成分腺苷就在2011年5月11日經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局(G20110369)批準(zhǔn)其腺苷的測(cè)定,按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的 “保健食品中腺苷的測(cè)定”規(guī)定的方法測(cè)定。

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部關(guān)于保健食品以冬蟲(chóng)夏草為原料的腺苷檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

(2003年版)

保健食品中腺苷的測(cè)定方法

1、范圍

本方法規(guī)定了保健食品中腺苷的測(cè)定方法

本方法適用于以冬蟲(chóng)夏草為主要原料的保健食品中腺苷的測(cè)定

本方法的檢出限:0.04μg

2、原理

本方法的本方法的線性范圍:0.40~60.0μg/mL。

將粉碎的膠囊試樣使用乙醇—水進(jìn)行提取,根據(jù)高效液相色譜紫外檢測(cè)器定性定量檢測(cè)。

3 試劑

除特殊說(shuō)明,所用試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為一級(jí)水。

3.1 磷酸二氫鉀。

3.2 無(wú)水乙醇優(yōu)

3.3 甲醇色譜純。

3.4 提取液乙醇:水=3:2。

3.5 腺苷標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱量腺苷標(biāo)準(zhǔn)品0.0100g,加入水溶解并定容至25mL。此溶液每mL含0.4mg腺苷。

4 儀器

4.1 高效液相色譜儀:附二級(jí)管陣列或紫外檢測(cè)器(UV)。

4.2 超聲波清洗器。

4.3 離心機(jī)。

5 分析步驟

5.1 試樣處理:取20粒以上膠囊試樣進(jìn)行粉碎混勻,準(zhǔn)確稱取適量試樣(精確至0.001g)于25mL容量瓶中,加入約20mL提取液,超聲提取10min。取出后加入提取液定容至刻度,混勻后以3000rpm/min離心3min。經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后供液相色譜分析用。

5.2 液相色譜參考條件

5.2.1 色譜柱:C18柱4.6×150mm,5μm。

5.2.2 柱溫:室溫。

5.2.3 刪除紫外檢測(cè)器:檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。

5.2.4 流動(dòng)相:甲醇:0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液=10:90。

5.2.5 流速:1.0mL/min。

5.2.6 進(jìn)樣量:10μL。

5.2.7 色譜分析:取10μL標(biāo)準(zhǔn)溶液及試樣溶液注入色譜儀中,以保留時(shí)間定性,以試樣峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。

腺苷標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 分別配制濃度為0.400、2.00、4.00、20.0、60.0μg/mL,腺苷標(biāo)準(zhǔn)溶液,在給定的儀器條件下進(jìn)行液相色譜分析,以峰高或峰面積對(duì)濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

5.4 分析結(jié)果的表示

5.4.1 計(jì)算

h1×C×V×100

X = ——————————

h2×m×1000

式中:X — 試樣中腺苷的含量,mg/100g;

h1 — 試樣峰高或峰面積;

C — 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,

V — 試樣定容體積,mL;

h2 — 標(biāo)準(zhǔn)溶液峰高或峰面積;

m — 試樣質(zhì)量,g

5.4.2 結(jié)果表示 計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。

6 技術(shù)參數(shù)

準(zhǔn)確度 方法的回收率在92.7%~98.3%之間。

允許差 在重復(fù)性條件下獲得的2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。

試驗(yàn)方法來(lái)源于《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)保健食品中腺苷的測(cè)定。 福建省疾病預(yù)防控制中心采用以上部頒的檢驗(yàn)方法,對(duì)送檢的“智得”牌菌絲粉膠囊的腺苷含

量進(jìn)行了三批次的嚴(yán)格檢測(cè),其腺苷含量為:0.056,超過(guò)《中國(guó)藥典》規(guī)定的冬蟲(chóng)夏草腺苷含量0.010,是它的5倍之多。

《中國(guó)藥典》(2005年版)對(duì)于冬蟲(chóng)夏草腺苷含量的測(cè)定全文如下:

冬 蟲(chóng) 夏 草

拼音名:Dongchongxiacao

英文名:CORDYCEPS

書(shū)頁(yè)號(hào):中國(guó)藥典2005年版一部-第 75 頁(yè)

(化學(xué)工業(yè)出版社2005年1月出版) 本品為麥角菌科真菌冬蟲(chóng)夏草菌Cordyceps sinensis (BerK.)Sacc. 寄生在蝙蝠娥科昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)上的子座及幼蟲(chóng)尸體的復(fù)合體。夏初子座出土、孢子未發(fā)散時(shí)挖取,曬至六七成干,除去似纖維狀的附著物及雜質(zhì),曬干或低溫干燥。

【性狀】 本品由蟲(chóng)體與從蟲(chóng)頭部長(zhǎng)出的真菌子座相連而成。蟲(chóng)體似蠶,長(zhǎng) 3~5cm,直徑 0.3~0.8cm ;表面深黃色至黃棕色,有環(huán)紋20~30個(gè),近頭部的環(huán)紋較細(xì);頭部紅棕色,足8對(duì),中部4對(duì)較明顯;質(zhì)脆,易折斷,斷面略平坦,淡黃白色。子座細(xì)長(zhǎng)圓柱形,長(zhǎng)4~7cm,直徑約 0.3cm;表面深棕色至棕褐色,有細(xì)縱皺紋,上部稍膨大;質(zhì)柔韌,斷面類白色。氣微腥,味微苦。

【含量測(cè)定】 按照高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;磷酸鹽緩沖液

(PH6.5)〔取0.01mol/L磷酸二氫鈉68.5ml與0.01mol/L磷酸氫二鈉31.5ml,混合(PH6.5)〕-甲醇(17:3)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。理論板數(shù)按腺苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取腺苷對(duì)照品適量,加90%甲醇制成每1ml含20μg的溶液,搖勻,即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過(guò)三號(hào)篩)約0.5g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加90%甲醇10ml,密塞,搖勻,稱定重量,加熱回流30分鐘,放冷,再稱定重量,用90%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測(cè)定,即得。

本品含腺苷(C10H13N5O4)不得少于0.010 %。

【性味與歸經(jīng)】 甘,平。歸肺、腎經(jīng)。

【功能與主治】 補(bǔ)肺益腎,止血化痰。用于久咳虛喘,勞嗽咯血,陽(yáng)痿遺精,腰膝酸痛。

【用法與用量】 3 ~9g。

【貯藏】 置陰涼干燥處,防蛀。

17、《智得》蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉膠囊采用的原料為單一的蝙蝠蛾被毛孢的菌絲粉,符合國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《真菌類保健食品申報(bào)與審評(píng)規(guī)定(試行)》可用于保健食品的真菌菌種品種名單規(guī)定。該蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉對(duì)大、小鼠急性毒性屬無(wú)毒級(jí),對(duì)原核生物未顯示出致突變性,對(duì)哺乳動(dòng)物體細(xì)胞和生殖細(xì)胞亦無(wú)致突變性?紤]到長(zhǎng)期食用的安全性和有效性,日推薦用量2g,服用量未超過(guò)中國(guó)藥典中冬蟲(chóng)夏草每日用量3~9g的下限,經(jīng)北京的中國(guó)疾控中心和福建省疾控中心的安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)和動(dòng)物功能試驗(yàn)證明,本品安全、有效。

“智得”蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉膠囊產(chǎn)品為增強(qiáng)免疫力的保健食品,選用膠囊劑型,相比片劑,工藝簡(jiǎn)單,易于操作。制成硬膠囊,可掩蓋本內(nèi)容物微苦味,且性質(zhì)穩(wěn)定,方便攜帶,崩解快,吸收也快,其生物活性成分利用度較高。

18、“智得”蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉膠囊試產(chǎn)成功后,又經(jīng)“國(guó)家興奮劑冬蟲(chóng)夏草真菌蝙蝠蛾被毛孢菌絲“智得”培殖及運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)測(cè)試研究中心”進(jìn)行興奮劑和性激素的檢測(cè),其編號(hào):09164的結(jié)果是:經(jīng)檢測(cè),未發(fā)現(xiàn)世界反興奮劑機(jī)構(gòu)2009年規(guī)定禁用的刺激劑、麻醉劑、阻斷劑、利尿劑和激素類藥物;其編號(hào):FD058的結(jié)果是未檢出雌二醇、雌三醇、孕酮、乙烯雌酚、睪酮性激素。

才會(huì)被福建省體育局的籃排球和田徑自行車運(yùn)動(dòng)管理中心等單位的運(yùn)動(dòng)員們進(jìn)行試用,普遍反映良好,其增強(qiáng)免疫力和抗疲勞的效果非常明顯,為福建省的體育健兒參加省內(nèi)外比賽運(yùn)動(dòng)能夠賽出優(yōu)異的成績(jī)做出了貢獻(xiàn),深受原中國(guó)女排主教練現(xiàn)任的福建省體育局陳忠和副局長(zhǎng)的贊賞,稱“智得”牌蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉膠囊是:“源于自然,超越野生”的好產(chǎn)品。是福建體育健兒常年必備的功能性保健食品。

19、“智得”固體培養(yǎng)繁殖蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉保健食品的問(wèn)世,可以說(shuō)是我國(guó)珍稀中藥材冬蟲(chóng)夏草人工制取研究開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)的又一重大突破。由于它的生物科技含量高,用途十分廣泛,不僅可以做為保健食品的功能原料,也可以用于生物、植物藥的復(fù)方研究和開(kāi)發(fā)。它將進(jìn)一步地滿足市場(chǎng)需求,減少對(duì)于天然野

生冬蟲(chóng)夏草的采挖量,保護(hù)珍稀的冬蟲(chóng)夏草資源和產(chǎn)區(qū)生態(tài),實(shí)現(xiàn)開(kāi)發(fā)與環(huán)保的和諧統(tǒng)一。

正因如此也才會(huì)被廈門(mén)新興產(chǎn)業(yè)促進(jìn)中心看中,就將“智得”固體培殖冬蟲(chóng)夏草真菌(蝙蝠蛾被毛孢)菌絲體開(kāi)發(fā)項(xiàng)目作為該中心與臺(tái)灣中醫(yī)藥界的同行進(jìn)行合作發(fā)展的交流項(xiàng)目之一,并于2009年被推薦參加了中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部在北京舉辦的《海峽兩岸中醫(yī)藥發(fā)展大會(huì)》,當(dāng)即受到了臺(tái)灣和大陸的專家學(xué)者、企業(yè)家們的好評(píng),洽談項(xiàng)目合作的投資者甚多。

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