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超氧化物歧化酶的活力測(cè)定
第
卷期
四
川 省衛(wèi)生 管 干理部 學(xué) 學(xué) 院
報(bào)年
月
超氧
化物 化歧酶 活 力 測(cè)的 定曾
勤
超尉氧 物化 化 酶 歧 自由基矛
〔
,
,安
敏
乙審
生校 教研化室
是清 除 內(nèi)體 氧超孑
的毒
黃嗦 嶺 一黃 嗦 氧化 酶吟作 為
系在 物,
了
的產(chǎn) 生
產(chǎn)
體子 的
生 的酶類 有保 護(hù)機(jī) 體 免
。
處測(cè)定
被雙
甲
孑原還
害的的作用
已
成為 當(dāng) 今 醫(yī)學(xué) 科 最 活學(xué) 躍的
研
究 領(lǐng)域之 一檢 測(cè)
。
活
力方 法的是 研
,究
。
量成整 個(gè) 應(yīng)反體 系 中
有,
,一
的屠 光吸 度來(lái) 間 接 定測(cè),
磷
酸鹽 緩
。
中 沖的一 個(gè) 首 要 問(wèn)的 本題 文復(fù) 習(xí) 有文關(guān) 就獻(xiàn)
液
在
常
的用測(cè) 定 方 簡(jiǎn) 要 法概 如述下
細(xì)胞 素色
嗓黃 嶺黃 嗦氧化嶺酶和 在存 下雙 月的生 被抑 制成仍 然啼,
,
,
還 法原明
了 還 的原性 而 計(jì) 設(shè)的
。
以制抑
的
一
量
為一個(gè)酶 活力位單正
常 值為
,
。法是利此用矛
,
黃
測(cè)
得人
士
拼
嶺 氧嗦 化催酶 黃化嗦 氧吟化生成 尿 酸
矛 將氧化和 細(xì)型 胞 色素
或
,卿 法 測(cè)定
核黃素士一有抑制
還原,成處 最有的吸大孑被
活力
原理的
是
,原還
后者在
型
還, 原 的 力能在 核 黃存素在 時(shí)經(jīng) 光照
收
。
當(dāng)有
。峰
存
在 時(shí)一 分部受 抑
制
和
,
產(chǎn)生 的反應(yīng)
,在
了 能
使℃
,
還
原
,而
抑
該
歧化 還 原 制
,
型
處的 吸
處測(cè)定
抑以制
收,峰值 下 降現(xiàn)
,
年
發(fā)
,還
原 應(yīng)反
的
量酶為 個(gè)
,一
單位
,
。
許時(shí)
是用此 法便 測(cè)該定酶活 力故該 的 經(jīng) 典 方 實(shí)法條
驗(yàn)
平。
,
〔 ,
在
一
。
氏法 的基礎(chǔ) 用 上計(jì)算
法已被 認(rèn) 是為檢測(cè)
機(jī)
進(jìn) 計(jì)行 算 和表 圖處理 算 出 抑制 百分 率
及件
為沖 液 制配在 應(yīng)為
規(guī) 定 抑制
。,
、
。,
酸 鉀磷 緩沖液℃ 的
驗(yàn)實(shí) 件條 測(cè) 下
,定
,
檢
樣 測(cè) 品 平均 為
,
的 活中力 得 到 常值
,正
氧化
型
,
黃 吟嗦氧 化 酶 用
緩邱清,
, 〔
〕
對(duì) 核黃 一素
,法 進(jìn) 行 改了 良他 們認(rèn)為 數(shù) 據(jù)在 理 處 時(shí)經(jīng)雙 數(shù)倒轉(zhuǎn)換后,
處
http://www.lotusphilosophies.com 吸 度 的 變 化光 分每 鐘的 吸 度 光變 的化值
抽提
液的樣加量
與
,在,
在時(shí) 還 存原 型
,
。
還
原 程 有 度極 好 的 線性 系關(guān)并 且
以
的 成生速 度 降 低 即 反應(yīng) 受到 抑 制
。
不 管同 加樣 量替代
意 ,
管
定 法 簡(jiǎn)測(cè)化了 操 作 ,
。。
還原 應(yīng)反
的量酶一為〔,
,
還
原法 現(xiàn) 已 廣泛 應(yīng)
用,
但 應(yīng) 用時(shí)應(yīng)
注 〔
幻
個(gè)�；� 力位單低
。年
。
從 力動(dòng)學(xué) 已
的 還原 機(jī) 復(fù) 雜制組 織 中 蛋雜 也白,
證實(shí) 了 此 法的可 靠 但性是 該方 法 敏靈 較
度影 響 定測(cè) 果 結(jié)特異 性 和 敏靈度 差 較亞
硝酸 鹽法
〔
,,
, ,
氮藍(lán)
四 哇
用利種
主要 是
,還
原〔法
,‘
的產(chǎn)了 生體 系 黃為 吟嗦一 黃 嗓氧吟
化來(lái)
定
測(cè)牙“
‘〕 ,
’
的 法 有 方 好幾,
酶
,
了 檢的體 系測(cè)輕 為胺經(jīng)
了
矛, 化氧 終最
的產(chǎn), 生 體系的 不同 如 嗓黃 吟核 素
黃 “幻
一
,
產(chǎn)物 亞 硝是 酸鹽
。
子再與峰
一蔡
胺一
嗦 吟氧化 酶黃
鄰苯, 三酚,
作用形成 色 有物 在
質(zhì)存下
, ,
在處
最大有吸收
,
等
物了 的
檢 測(cè)體 系
為
,一
被? 朝雙譽(yù) 雙叫 蘭 咨 紫 色 合 化物在 是
還 原 的產(chǎn)了
了
相應(yīng) 減少 ,
最后成形 的。
亞
酸硝減少鹽
處
測(cè)檢,
此
法
有
最 吸 大收
峰
。?
淑陳英
〕
仁利用
雖
然 屬 點(diǎn) 終 但 具法 敏靈 高度 性 范線圍 時(shí)
間
,
卷
期
曾 勤超氧 化 物歧化酶 的 活力測(cè) 定
長(zhǎng) 法
,
分
,鐘
試
劑 容 易保存 樣 品用 量 微
,雜
,。
酶算力 活如 用 果較 偏離
, 遠(yuǎn),
的
制率抑來(lái)。
干 擾 質(zhì)小 優(yōu)等點(diǎn)
法
“,,
曾 比較
,
計(jì),算 酶 活 力結(jié) 造果成 偏離 實(shí) 際值 大 很筆者
,
法
鄰 苯 三 酚 腎上法 腺
認(rèn)為抑 制 越 率接近
,
,
計(jì)算
結(jié)果 越接
近
。
法素化 學(xué) 發(fā) 光 法 亞 與酸硝 鹽法 測(cè)
定 敏 度 并靈觀 牛察 血 白蛋清
,白,
的
對(duì)定測(cè)
實(shí)際 值好最 在
,一
范寫(xiě)圍 內(nèi)
還嚴(yán)格應(yīng)。
控制緩 體沖 的
和系苯三鄰酚濃
度,
法該
結(jié)
的果影響 結(jié) 果 是 其 亞 硝酸鹽 法 與化 學(xué) 發(fā)光 法 靈敏度 高 可 于用 測(cè)
,
檢的 優(yōu)點(diǎn) 是所 用試 劑和儀器 較 比簡(jiǎn) 單操作簡(jiǎn)
含
量很微 的
一
便 溫度
℃,對(duì) 反速應(yīng)的影率響
較,‘‘ ,
品 樣如 血 或清血 中漿
,
和
小
,
〔, “
,
重
復(fù)性好
批
一內(nèi)
,
批間
,
〔 ,
的。測(cè)
利用定
〔,
”
。
該方
法受
影的 最響 小
一
緯
。此法測(cè)
靈敏度
低
鄰苯 酚三自氧 化 法
了 的氧 性 質(zhì)化來(lái) 測(cè)定
〔
化發(fā)學(xué)光 法 幻
〔的方了
,。
以
黃吟嗦 黃一嶺氧化嗦酶體系產(chǎn)生子
與 化學(xué) 光劑 魯發(fā) 諾米,
,
法
有 腎 上腺 素氧化自法 和 鄰川 苯三 酚 氧自
反
,化法 川
中液
〔。
用常的是 后
者
,
。鄰
苯 三 酚在 酸性 溶 ,
應(yīng) 使 激 之 當(dāng) 發(fā) 它 回 返基態(tài) 就時(shí)向外 發(fā) 光這種 現(xiàn) 稱象為 化學(xué) 發(fā)光可 抑制 魯 米諾 發(fā) 光,
。穩(wěn)
定 在 堿 條 件性下
矛發(fā)
。
‘,
清能除
矛
,故
,
一生
自身 氧化 還原 反 應(yīng) 產(chǎn)生
,
測(cè) 系檢 統(tǒng)
也最大有
。
應(yīng)用 光儀發(fā) 定兩測(cè)次 發(fā)
,
是
鄰 苯三 酚 其氧化 自 產(chǎn)物 吸在收
峰。
光一次 空為 白管 發(fā) 光 強(qiáng)度 定
為在
存在 下自氧化 反應(yīng)受 到 抑
次,為 加 的入活力
。,
測(cè) 定管的 強(qiáng)度 可計(jì)算的出
,
制
制
法
。若
的,
過(guò)量
制 抑程度 可達(dá),
抑
以
化 學(xué) 發(fā) 。光 法測(cè) 定 時(shí)間 響應(yīng)快
,
量為個(gè)一 酶活力單
。
位
原,
一 但
加魯 米 入諾試 使 立 劑即 反 可 以應(yīng) 跟 反蹤 應(yīng) 初速 度 很 受少產(chǎn) 物或 他其 因的素 影響。
〔
,
應(yīng) 用中的條 件是
,,,
一
二 甲 酸砷
鈉
緩沖 鄰 液 苯三 酚 終濃 度
為據(jù)根
,,
,
〔
,的
比 較該法的 敏靈 最
度 ,
,
,處 檢測(cè) 自氧化 速率 為
高 樣 用 品 量少 樣品 雜 中質(zhì)干 擾 不 小用
對(duì)
,該法 是國(guó) 應(yīng) 用 最 多 內(nèi)的方 法 之 一 并且
不斷加 以改 良,
樣
品 進(jìn) 行 化純 處理 用可于 初 酶提取 液 的 測(cè) 定 專 一性
強(qiáng) 但需 要 特殊 的 器儀發(fā) 光
儀,
,。
〔一‘ ,“
。
文獻(xiàn)
“〔
?
’,
都改 用。
波長(zhǎng) 鄰苯 三 酚終 濃 度降低 到 自 氧化 速 率
達(dá) 。。,
化 學(xué) 光發(fā) 法在 內(nèi)國(guó)的 用應(yīng) 也很 廣泛
參
,
。
因 降為低 苯鄰三
文
考
獻(xiàn)
酚終濃 度提高
可
抑 制該反應(yīng) 靈的
對(duì)敏
其
度
�！�
。
鄰 苯三
酚 的濃 度 和 緩液沖的
,
自氧
率化的 影響 較 濃 大 或
度
升 , 高氧自丁
克,
化 率 隨之 升 高但線性 范 圍相 應(yīng) 縮 小
祥,〔‘ ,
砂
,在反 應(yīng)
分
后 鐘 加入一 滴終 液止這 有
。,
,
利于 大樣 品量 的檢
,測(cè)
筆
者 也 曾 用 加人 終
一止。
,
試
劑 的 方 法 測(cè) 定了 和人 動(dòng) 物組 織及 林求
度
為 ‘
,
,
,,
但
發(fā) 現(xiàn) 會(huì) 低降 吸光度 而 影 響 靈 度 方
敏用間 苯生 酚 替 代 鄰 苯 三酚 測(cè)定
,
。
淑 英陳朱 漢 民謝 輝 人 細(xì)紅 胞內(nèi) 超 氧物化 歧 化酶 比
色
,
,活
性 得 到 較滿為意 的 效 果間 三 酚 的 宜 濃
適 ,
。
,側(cè)定 中華法 年老 醫(yī) 學(xué)雜 志,
,
舫
,
在
使 用該 法 檢 時(shí)測(cè) 應(yīng)注 意每 測(cè)次 定 都
,
許平超 氧 化物 歧 化 酶 活 力 測(cè) 定中 華 醫(yī) 學(xué) 檢驗(yàn) 雜 志
,
通 過(guò) 調(diào)整要 量 酶使制抑 達(dá) 率
到能計(jì)才
?
四 ?川省 衛(wèi) 生 管 理 干部 學(xué) 院 報(bào)
學(xué)
,
清邱 汪建 平 王 心如 四 氮 哇 藍(lán)側(cè) 定 紅細(xì) 胞 氧超 物化歧 ,
,
,
‘
吧化
醉 力 活 法方 的 改良 華中 學(xué) 醫(yī) 槍臉 雜
,志
卜
,,
,
、,
謝 衛(wèi)
華姚菊 芳 袁 生 等勤 連笨 階 自氧三化法 測(cè) 定
超,
大柳善彥
定法側(cè)蛋 白 核酸 素醉日
,
級(jí)化 歧 物醉 化 性 活 改的進(jìn)
,,,
。
醫(yī) 藥
工業(yè)
,
鄒 林 佳國(guó) 芬 興 曉鐘 等凌一 種 呂
《
〕
的側(cè)活 方
法卜
巴
呂
鄰笨 三 階自 化載 法的 改進(jìn) 生 物 物 理 與生物 化學(xué) 進(jìn) 展
,
—
,
卜
,
,
,
丁
克詳 永先鐘姚樹(shù)人
,
,
徽
血超 指 氧化 醉快速瀏 定
任立英 陳小 剛 張 憊 徑等 胺 法色 法側(cè) 定 超載 化物 歧 ,
法的研究 ,
年老 雜 志學(xué)
,
,化
醉。
臨槍 驗(yàn)床 雜
,
志
,一
方
求 林 嵐 陳 謙 等紀(jì)
, 超氧化歧物化 醉活 性 側(cè)定
的,
卜,
間苯 三醋替代 試 探 國(guó) 中生 化 藥 雜物 志卜
李 益 方 允 新中超 級(jí)化 物歧 化 醉 活 力 側(cè) 定 的 方新 法
‘,
,
—化
發(fā)學(xué) 光
法生 物
理 與 物生 化物 學(xué)進(jìn)
展,
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收
稿
上 第接
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叩 勿,口
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