甲醇利用菌SDM11中g(shù)lyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達

摘要： 對甲醇降解菌Methylobacterium.sp SDM11中的glyA基因進行克隆及特性研究,以獲得更多的絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)資源.根據(jù)GenBank中已報道的Methylobacterium extorquens AM1 中的glyA基因序列(登錄號:L33463)設(shè)計引物,以SDM11的基因組DNA為模板,PCR擴增glyA基因.利用pETblue-2載體將該基因在大腸桿菌BL21(DE3)中得到表達.PCR擴增到一個1.40 kb大小的DNA片段,經(jīng)過blast軟件比對分析,發(fā)現(xiàn)該片段與已報道的Methylobacterium extorquens AM1的glyA基因的序列相似性為95%,氨基酸序列的相似性為98%.該基因編碼468個氨基酸,預(yù)測的分子量大小為52.2 kD,等電點為7.02,發(fā)現(xiàn)純化后的目標蛋白具有SHMT酶活性,并初步測定了酶活力. 作 者： 孔慶勝    張向陽    韓曉琳    林強    董全林   作者單位： 孔慶勝,張向陽,韓曉琳(濟寧醫(yī)學(xué)院,日照,276826)

林強,董全林(華中科技大學(xué),武漢,430071) 

期 刊： 生物技術(shù)通報  PKU   Journal： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010, ""(5)  分類號：   關(guān)鍵詞： SDM11    glyA基因    克隆    表達    SHMT酶   

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