奶牛卵泡超數(shù)同步發(fā)育及其卵母細胞的發(fā)育潛能

目的 建立促奶牛卵泡超數(shù)同步發(fā)育的方法,并利用體細胞核移植和分子技術(shù)評價來自這些卵泡的卵母細胞發(fā)育潛能.方法 用E2-P4對淘汰的高產(chǎn)奶牛進行聯(lián)合處理后,分別對其實施不同組合的外源促性腺激素處理 [FSH 12 h組,FSH 48 h組,FSH 48 h-LH 6 h組(簡稱LH 6 h組),FSH48 h-LH 26 h組(簡稱LH 26 h組)] 以促進其卵泡超數(shù)同步發(fā)育;然后從卵泡中回收COCs進行體外成熟,排放第一極體的卵供作優(yōu)質(zhì)種牛的體細胞核轉(zhuǎn)移(nuclear transfer,NT)受體,以評價卵的發(fā)育潛能.結(jié)果 E2-P4能成功地誘導(dǎo)奶牛卵巢中產(chǎn)生一個新的卵泡起始波,并能保證卵泡在外源促性腺激素作用下實現(xiàn)超數(shù)同步發(fā)育;上述四組不同組合外源促性腺激素處理的卵母細胞衍生的NT重構(gòu)胚經(jīng)體內(nèi)培養(yǎng)7 d后,后3組的囊胚發(fā)育率顯著高于FSH 12 h組和對照組(P<0.01);將這些克隆囊胚移植同步發(fā)情的受體牛子宮后,僅LH 26 h組的卵所獲得的克隆胚能實現(xiàn)全程發(fā)育(直至克隆小牛出生).經(jīng)RT-PCR分析顆粒細胞中FSHr、LHr 和連接蛋白43(Connexin 43,Cx 43)等mRNA含量變化,以及Western印跡分析其Bcl-2和Bax蛋白表達水平的變化,證實該組卵巢提供的同步發(fā)育卵泡為早期閉鎖卵泡.結(jié)論 E2-P4-FSH48h-LH26h組合處理可人為調(diào)控牛卵泡的同步發(fā)育;處于早期閉鎖狀態(tài)卵泡的卵母細胞具備較高的發(fā)育潛能.

作 者： 陳娟 沙紅英 田海濱 丁利軍 黃志軍 陳建泉 葛來香 徐旭俊 吳友兵 成國祥 CHEN Juan SHA Hong-ying TIAN Hai-bin DING Li-jun HUANG Zhi-jun CHEN Jian-quan GE Lai-xiang XU Xu-jun WU You-bing CHENG Guo-xiang   作者單位： 陳娟,徐旭俊,吳友兵,成國祥,CHEN Juan,XU Xu-jun,WU You-bing,CHENG Guo-xiang(同濟大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,上海,200092;上海轉(zhuǎn)基因研究中心,上海,201203)

沙紅英,SHA Hong-ying(同濟大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,上海,200092)

田海濱,黃志軍,陳建泉,葛來香,TIAN Hai-bin,HUANG Zhi-jun,CHEN Jian-quan,GE Lai-xiang(上海轉(zhuǎn)基因研究中心,上海,201203)

丁利軍,DING Li-jun(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院,上海,200025;上海轉(zhuǎn)基因研究中心,上海,201203) 

刊 名： 中國比較醫(yī)學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE  年，卷(期)： 2008 18(4)  分類號： Q813  關(guān)鍵詞： 奶牛   卵   E2-P4-FSH-LH組合處理   重構(gòu)胚發(fā)育潛能  

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