PEP-1肽介導(dǎo)人Cu,Zn-SOD轉(zhuǎn)導(dǎo)入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

目的:構(gòu)建原核表達(dá)載體pET15b-PEP-1-SOD1,觀察表達(dá)的融合蛋白PEP-1-SOD1能否進(jìn)入細(xì)胞. 方法:以pBluescript II SK-SOD1質(zhì)粒為模板, PCR擴(kuò)增SOD1 cDNA. 經(jīng)酶切后分別構(gòu)建原核表達(dá)載體pET15b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,分別轉(zhuǎn)化大腸桿菌,表達(dá)SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白,將鑒定和純化后的融合蛋白加入體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞. 結(jié)果:得到高純度的、有活性的SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白. PEP-1-SOD1融合蛋白能高效地轉(zhuǎn)導(dǎo)入體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,并表現(xiàn)出劑量依賴性和時間依賴性的特點(diǎn);一旦進(jìn)入細(xì)胞,PEP-1-SOD1融合蛋白可以維持48 h. 結(jié)論: PEP-1-SOD1融合蛋白能高效地轉(zhuǎn)導(dǎo)入體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,為SOD1進(jìn)入組織細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮治療作用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).

作 者： 丁鵬 王家寧 黃永章 駱麗娜 邵芳 DING Peng WANG Jia-Ning HUANG Yong-Zhang LUO Li-Na SHAO Fang   作者單位： 丁鵬,DING Peng(鄖陽醫(yī)學(xué)院附屬人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究所,湖北,十堰,442000;平頂山煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院,河南,平頂山,467000)

王家寧,黃永章,WANG Jia-Ning,HUANG Yong-Zhang(鄖陽醫(yī)學(xué)院附屬人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究所,湖北,十堰,442000)

駱麗娜,邵芳,LUO Li-Na,SHAO Fang(平頂山煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院,河南,平頂山,467000) 

刊 名： 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 27(9)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 超氧化物歧化酶   原核表達(dá)   PEP-1肽   融合蛋白  

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