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利用改進的Oligo-capping法構建手掌參全長cDNA文庫
Oligo-capping法是構建全長cDNA文庫的重要方法之一.以名貴中藥手掌參(Gymnadenia conopsea R.Br.)的幼芽組織為材料,通過減少mRNA的用量,用pUC18作載體,設計特異引物對第1鏈cDNA進行PCR擴增,按片段大小分級回收cDNA,形成了一種以Oligo-capping法為基礎,構建珍稀材料全長cDNA文庫的快速、簡單的技術體系.利用該方法,首次成功地構建了手掌參的全長cDNA文庫.經綜合評價,文庫容量達到了8×105個/μg cDNA,全長cDNA比例達到68%,重組率超過96%,說明本實驗的改進非常成功.該文庫的建成為手掌參的遺傳資源保護和功能基因發(fā)掘等理論與應用研究奠定了基礎.
作 者: 周建平 楊足君 白麗莉 馮娟 李光蓉 鄧科君 任正隆 ZHOU Jian-ping YANG Zu-jun BAI Li-li FENG Juan LI Guang-rong DEN Ke-jun REN Zheng-long 作者單位: 中國電子科技大學,生命與技術學院,成都,610054 刊 名: 西北植物學報 ISTIC PKU 英文刊名: ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA 年,卷(期): 2006 26(9) 分類號: Q343.1 關鍵詞: 全長cDNA文庫 Oligo-capping法 手掌參【利用改進的Oligo-capping法構建手掌參全長cDNA文庫】相關文章:
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