腺病毒載體介導的GFP基因在鴨胚成纖維細胞中的表達及RNA干擾

目的:建立在鴨胚成纖維細胞(DEF)中進行RNA干擾(RNAi)的技術平臺,為鴨基因組功能的研究提供新的技術手段.方法:以綠色熒光蛋白(GFP)基因為報告基因,脂質體轉染化學合成的GFP特異小于擾RNA(GFP-siRNA),用流式細胞儀測定GFP-siRNA對重組腺病毒(Adv-GFP)介導的GFP基因在DEF中表達的干擾效果.結果:200 MOI(感染復數(shù))Adv-GFP介導的GFP基因在DEF中表達效率最高,為31.20%+3.11%,對DEF的活力無明顯影響;GFP-siRNA能有效干擾GFP基因在DEF中的表達,相對抑制率為98.56%.結論:在DEF中進行RNAi是可行的,Adv-GFP是介導外源基因在DEF中表達較為理想的載體;首次建立了在DEF中進行RNAi的技術平臺,為鴨基因組的功能等研究提供了新的技術手段.

作 者： 孟宇航 湯承 楊發(fā)龍 鄧書 岳華 于學輝 MENG Yu-Hang TANG Cheng YANG Fa-Long DENG Shu YUE Hun YU Xue-Hui   作者單位： 西南民族大學,生命科學與技術學院,四川,成都,610041  刊 名： 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分類號： Q78 R394  關鍵詞： 鴨胚成纖維細胞   RNA干擾   腺病毒載體   綠色熒光蛋白   鴨  

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