綠色熒光蛋白gfp基因在鈍頂螺旋藻(Spirulina platensis)A9藻株中的表達(dá)

將鈍頂螺旋藻(Spirulina platensis)A9藻株在24℃培養(yǎng),經(jīng)2 mmol/L的EDTA預(yù)處理24 h;采用功率300 W的超聲波處理70 s獲得單細(xì)胞樣品,以本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的攜帶gfp基因的質(zhì)粒p215t轉(zhuǎn)化A9藻株單細(xì)胞藻液,利用Amp作為選擇標(biāo)記,使單細(xì)胞在平板上再生長(zhǎng)出單藻落,獲得17株具有Amp抗性的轉(zhuǎn)化藻株,轉(zhuǎn)化率3.73‰.在390 am紫光激發(fā)下,生長(zhǎng)30天的轉(zhuǎn)化藻絲體發(fā)出穩(wěn)定綠色熒光;培養(yǎng)45天后具有綠色熒光的藻絲出現(xiàn)斷裂、具有熒光藻絲長(zhǎng)度縮短的現(xiàn)象.實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步表明:報(bào)告基因gfp在螺旋藻中得到穩(wěn)定有效的表達(dá),可以采用單細(xì)胞再生形成單藻落技術(shù)進(jìn)行螺旋藻的基因克隆.

作 者： 張海生 葉霽 唐欣昀 王芬 曹媛媛 張明 ZHANG Hai-sheng YE Ji TANG Xin-yun WANG Fen CAO Yuan-yuan ZHANG Ming   作者單位： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,安徽,合肥,230036  刊 名： 激光生物學(xué)報(bào)  ISTIC 英文刊名： ACTA LASER BIOLOGY SINICA  年，卷(期)： 2008 17(1)  分類號(hào)：   關(guān)鍵詞： 鈍頂螺旋藻   gfp基因   轉(zhuǎn)化   單細(xì)胞再生   綠色熒光  

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