麻瘋樹脂酶全長基因克隆、表達(dá)及其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測

脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍應(yīng)用于皮革、飼料及生物柴油工業(yè)的工業(yè)酶制劑,具有廣泛的應(yīng)用價值.目前對植物來源的脂酶研究較少.本研究用在生物柴油中具有應(yīng)用前景的油料植物--麻瘋樹(Jatropha curcas)作為研究對象,克隆了該物種的脂酶基因(JcLIP).通過多序列比對并結(jié)合物種的親緣關(guān)系設(shè)計了具有較高特異性的簡并引物,通過使用RT-PCR和lRACE技術(shù),最終獲得了麻瘋樹脂酶基因的全長序列并成功地在大腸桿菌中表達(dá),酶活測定結(jié)果表明,麻瘋樹脂酶在大腸桿菌中表達(dá)在包涵體中,但是能產(chǎn)生具有活力的蛋白質(zhì),酶活約為0.8 U·mL-1.結(jié)構(gòu)預(yù)測和比較表明,JcLIP蛋白質(zhì)具有脂酶的結(jié)構(gòu)核心和催化活性中心,而在非核心區(qū)具有較毛霉脂酶更多的插入和隨機(jī)卷曲,這可能是決定二者之間酶活差異的重要原因.

作 者： 王小行 彭峰 牛冬云 李鋼 陳放 Xiaoxing Wang Feng Peng Dongyun Niu Gang Li Fang Chen   作者單位： 王小行,陳放,Xiaoxing Wang,Fang Chen(四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,成都,610064)

彭峰,牛冬云,李鋼,Feng Peng,Dongyun Niu,Gang Li(四川川大光耀生物工程有限公司,成都,610065) 

刊 名： 植物學(xué)通報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE BULLETIN OF BOTANY  年，卷(期)： 2006 23(6)  分類號： Q94  關(guān)鍵詞： 脂酶   麻瘋樹   簡并引物   蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)  

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