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人胎盤層粘連蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

時(shí)間:2023-04-29 17:06:08 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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人胎盤層粘連蛋白單克隆抗體的制備與鑒定

目的 獲得能特異性識(shí)別人層粘連蛋白(hLN)的單克隆抗體(McAb).方法 用純化的人層粘連蛋白(hLN)作抗原免疫Balb/C小鼠,以細(xì)胞融合、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)篩選和克隆化技術(shù)獲得抗hLN的雜交瘤細(xì)胞株;用生物學(xué)方法鑒定雜交瘤細(xì)胞,用免疫學(xué)方法鑒定McAb的特異性.結(jié)果 獲得4株穩(wěn)定分泌抗人LN的雜交瘤細(xì)胞株(2A1、3B5、2C4、4D1),培養(yǎng)上清的ELISA效價(jià)分別為:1:512、1:1 024、1:512、1:256;腹水效價(jià)分別為:1×106、1×107、1×106、1×105;采用ELISA相加法表明2A1、4D1與3B5、2C4識(shí)別的hLN上的抗原決定簇和識(shí)別的不同,4株單抗均屬實(shí)IgG.結(jié)論 成功建立了4株穩(wěn)定分泌抗人LN McAb的雜交瘤細(xì)胞株,它們分別識(shí)別hLN上2個(gè)不同的抗原位點(diǎn),有望作為hLN定量檢測(cè)的特異性抗體.

作 者: 曾憲威 蔣藝勤 肖靜 楊元好 ZENG Xian-wei JIANG Yi-qing XIAO Jing YANG Yuan-hao   作者單位: 廣東省深圳市寶安區(qū)松崗人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,深圳,518105  刊 名: 熱帶醫(yī)學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名: JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE  年,卷(期): 2007 7(7)  分類號(hào): Q513.2  關(guān)鍵詞: 層粘連蛋白   單克隆抗體   酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)   制備  

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