人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和端粒酶催化亞基復(fù)合調(diào)控序列的構(gòu)建及轉(zhuǎn)錄活性的研究

以人肝癌細(xì)胞基因組DNA為模板,應(yīng)用PCR方法擴(kuò)增VEGF增強(qiáng)子和hTERT核心啟動(dòng)子序列,該序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)參考序列相比,同源性達(dá)到99%以上.將VEGF增強(qiáng)子和hTERT核心啟動(dòng)子定向克隆到pBluescript Ⅱ SK載體中,構(gòu)建VEGF增強(qiáng)子和hTERT核心啟動(dòng)子復(fù)合調(diào)控序列.酶切去除表達(dá)載體pECFP-C1的啟動(dòng)子CMV,并將所制備的復(fù)合調(diào)控序列連接到CMV位置,構(gòu)建含該復(fù)合調(diào)控序列并可表達(dá)綠色熒光蛋白報(bào)告基因的重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染人肺癌細(xì)胞和正常人肝細(xì)胞.結(jié)果顯示,在人肺癌細(xì)胞中觀察到綠色熒光,而在人肝細(xì)胞中沒(méi)有檢測(cè)到.由此說(shuō)明,具有腫瘤特異性的VEGF增強(qiáng)子和hTERT核心啟動(dòng)子復(fù)合轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列可以驅(qū)動(dòng)綠色熒光蛋白基因在人肺癌細(xì)胞中表達(dá),但不能驅(qū)動(dòng)該蛋白在正常人肝細(xì)胞中表達(dá).

作 者： 胡薇 郝軍元 艾永興 張英波 張玉靜 HU Wei HAO Jun-yuan AI Yong-xing ZHANG Ying-bo ZHANG Yu-jing   作者單位： 胡薇,HU Wei(吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部畜牧獸醫(yī)學(xué)院動(dòng)物生物技術(shù)系,長(zhǎng)春,130062;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院,長(zhǎng)春,130118)

郝軍元,艾永興,張英波,張玉靜,HAO Jun-yuan,AI Yong-xing,ZHANG Ying-bo,ZHANG Yu-jing(吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部畜牧獸醫(yī)學(xué)院動(dòng)物生物技術(shù)系,長(zhǎng)春,130062) 

刊 名： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF JILIN AGRICULTURAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 28(2)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： VEGF增強(qiáng)子   hTERT核心啟動(dòng)子   綠色熒光蛋白   表達(dá)  

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