隨機(jī)十肽庫的構(gòu)建及血管形成素結(jié)合肽的篩選

將合成的含有隨機(jī)序列(NNK)10的寡核苷酸片段,克隆入噬菌體呈現(xiàn)載體噬菌粒pCANTAB5E的SfiⅠ,NotⅠ位點(diǎn),即cpⅢ蛋白信號(hào)肽與成熟肽之間,電轉(zhuǎn)化E.coli TG1,構(gòu)建了噬菌體表面呈現(xiàn)的十肽庫,實(shí)際庫容為3.53×107,插入率為66.7%.經(jīng)輔助噬菌體M13KO7超感染后,獲得滴度為4.8 ×1011 pfu/ml的噬菌體上清.經(jīng)過兩輪panning篩選和富集,從構(gòu)建的隨機(jī)十肽庫中篩選到26個(gè)具有血管形成素結(jié)合活性的重組噬菌體克隆,對(duì)其中12個(gè)陽性噬菌體克隆的短肽序列進(jìn)行了分析,ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示12個(gè)陽性噬菌體克隆都能夠與血管形成素特異性結(jié)合.

作 者： 楊輝 張英起 顏真 韓葦 藥立波 蘇成芝 YANG Hui ZHANG Ying-Qi YAN Zhen HAN Wei YAO Li-Bo SU Cheng-Zhi   作者單位： 楊輝,張英起,顏真,韓葦,YANG Hui,ZHANG Ying-Qi,YAN Zhen,HAN Wei(第四軍醫(yī)大學(xué)生物技術(shù)中心,西安,710032)

藥立波,蘇成芝,YAO Li-Bo,SU Cheng-Zhi(第四軍醫(yī)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室,西安,710032) 

刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(6)  分類號(hào)： Q74  關(guān)鍵詞： 噬菌體表面呈現(xiàn)   隨機(jī)短肽庫   血管形成素  

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