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大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)表型鑒定與標(biāo)記
目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)體外分離培養(yǎng)、表型鑒定和標(biāo)記的方法,為臨床進(jìn)行細(xì)胞移植治療心、肝、腦等器官急性衰竭提供種子細(xì)胞.方法無菌條件下取大鼠股骨、脛骨和腓骨,用沖洗法沖出骨髓,用直接貼壁法分離純化MSCs,體外擴(kuò)增,用免疫細(xì)胞化學(xué)法及流式細(xì)胞儀分別對(duì)培養(yǎng)的MSCs進(jìn)行鑒定,并檢測(cè)第3代MSCs的細(xì)胞周期.結(jié)果體外培養(yǎng)的原代MSCs 72 h內(nèi)可見有少量貼壁細(xì)胞,7 d左右達(dá)到匯合.免疫細(xì)胞化學(xué)示,MSCs CD29、CD44、CD73、CD105、CD166表達(dá)陽性,而CD14、CD34、CD45表達(dá)陰性.流式細(xì)胞儀示,CD14陽性率為0.19%、CD29為64.36%、CD34為0.17%、CD44為86.73%、CD45為0.18%、CD73為90.21%、CD105為74.25%、CD166為54.60%.細(xì)胞周期顯示,第3代MSCs約有90%的細(xì)胞處于G0/G1期.結(jié)論MSCs在體外很容易分離培養(yǎng)和擴(kuò)增,DAPI標(biāo)記MSCs敏感性好,標(biāo)記效率高,可作為標(biāo)記細(xì)胞的一種有效手段,MSCs體外培養(yǎng)成功為細(xì)胞移植治療急危重癥器官衰竭提供新的治療途徑.
作 者： 何忠杰 馬俊勛 方馳華 楊麗萍 作者單位： 何忠杰,馬俊勛(南方醫(yī)科大學(xué)附屬珠江醫(yī)院普通外科,廣東,廣州,510280)方馳華(中國人民解放軍總醫(yī)院304急救部,北京,100037)
楊麗萍(中國人民解放軍總醫(yī)院304燒傷研究所,北京,100037)
刊 名： 中國急救醫(yī)學(xué) ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CRITICAL CARE MEDICINE 年，卷(期)： 2005 25(12) 分類號(hào)： Q503 Q813.1+1 關(guān)鍵詞： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 分離培養(yǎng) 表型 細(xì)胞周期 大鼠 流式細(xì)胞儀【大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)表型鑒定與標(biāo)記】相關(guān)文章：
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