CRP基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建和表達(dá)及其免疫原性檢測(cè)

采用大腸桿菌表達(dá)體系來(lái)獲得C-反應(yīng)蛋白(CRP)融合蛋白.以pDNR-CRP質(zhì)粒為模板,用PCR方法擴(kuò)增獲得全長(zhǎng)的CRP基因,將其克隆入表達(dá)載體pET28a(+)中,再轉(zhuǎn)化到宿主菌BL21(DE3)中,加入IPTG誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物做SDS-PAGE電泳分析,最后做免疫原性檢測(cè).成功地構(gòu)建了CRP基因原核表達(dá)載體pET28a(+)-CRP,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)SDS-PAGE電泳分析表明C-反應(yīng)蛋白能在大腸桿菌中獲得表達(dá),但免疫原性檢測(cè)初步結(jié)果為陰性.結(jié)果證明CRP能以融合蛋白的形式在宿主菌BL21(DE3)中得到大量表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物缺乏免疫原性,其機(jī)理還有待進(jìn)一步試驗(yàn)探討.

作 者： 余云芳 姚偉 張昌菊 魯林 何正權(quán) 樂(lè)超銀 梁宏偉 YU Yun-fang YAO Wei ZHANG Chang-ju LU Lin HE Zheng-quan YUE Chao-yin LIANG Hong-wei   作者單位： 余云芳,YU Yun-fang(三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002;三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院,宜昌,443002)

姚偉,YAO Wei(三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002;福建農(nóng)林大學(xué),農(nóng)業(yè)部甘蔗生理生態(tài)與遺傳改良重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,福州,350002)

張昌菊,ZHANG Chang-ju(三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院,宜昌,443002)

魯林,何正權(quán),樂(lè)超銀,梁宏偉,LU Lin,HE Zheng-quan,YUE Chao-yin,LIANG Hong-wei(三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心,宜昌,443002) 

刊 名： 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS(NATURAL SCIENCES EDITION)  年，卷(期)： 2006 28(2)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： C反應(yīng)蛋白   原核表達(dá)   IPTG   免疫原性  

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