耐熱過氧化氫酶基因工程菌的構(gòu)建及其發(fā)酵條件

利用PCR擴增技術(shù)以嗜熱脂肪芽孢桿菌IAM11001染色體DNA為模板,擴增得到嗜熱脂肪芽孢桿菌過氧化氫酶編碼基因perA.再與經(jīng)EcoR Ⅰ酶切的溫控表達載體pBV220連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒,并轉(zhuǎn)化宿主大腸桿菌JM109,得到耐熱過氧化氫酶基因工程菌,然后對該工程菌在LB培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基中的發(fā)酵條件進行了優(yōu)化.結(jié)果表明:在LB培養(yǎng)基中,誘導(dǎo)時期和酶合成最佳誘導(dǎo)時間均為5 h,最大產(chǎn)酶量達到72.9 U/mL;在半合成培養(yǎng)基中,于30℃培養(yǎng)4 h,再于42℃誘導(dǎo)培養(yǎng)6 h,產(chǎn)酶量最高達到131 U/mL.

作 者： 段緒果 沈微 李艷麗 饒志明 唐雪明 方慧英 劉吉泉 諸葛健 DUAN Xu-guo SHEN Wei LI Yan-li RAO Zhi-ming TANG Xue-ming FANG Hui-ying LIU Ji-quan ZHUGE Jian   作者單位： 江南大學(xué),工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室,江蘇,無錫,214036  刊 名： 食品與生物技術(shù)學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 25(2)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 耐熱過氧化氫酶   基因工程菌   溫控表達載體   發(fā)酵條件  

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