利用噬菌體展示肽庫(kù)篩選雞傳染性支氣管炎病毒模擬抗原表位

目的:利用噬菌體展示肽庫(kù)技術(shù)篩選雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)的模擬抗原表位.方法:用IBV陽(yáng)性血清純化IgG作為靶標(biāo),對(duì)噬菌體展示隨機(jī)12肽庫(kù)進(jìn)行篩選,通過ELISA和競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA鑒定篩選克隆的結(jié)合特性,并對(duì)陽(yáng)性克隆提取ssDNA進(jìn)行測(cè)序分析.結(jié)果:3輪生物淘洗后,目標(biāo)噬菌體得到125倍富集.隨機(jī)挑選50個(gè)克隆進(jìn)行ELISA和競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA,其中有12個(gè)噬菌體克隆可以與IBV陽(yáng)性血清高特異性結(jié)合.測(cè)序分析發(fā)現(xiàn),這12個(gè)克隆帶有2種氨基酸序列,即KSPKHSSSALHF和SFFQLNLHRPTS,且未發(fā)現(xiàn)這2種序列與GenBank中巳發(fā)表的IBV氨基酸序列有同源性.結(jié)論:結(jié)果提示,這2個(gè)肽可能是IBV抗原的模擬表位.

作 者： 安燁 王宏俊 張培君 AN Ye WANG Hong-jun ZHANG Pei-jun   作者單位： 安燁,AN Ye(北京市農(nóng)林科學(xué)院,畜牧獸醫(yī)研究所,北京,100097;首都師范大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,北京,100037)

王宏俊,張培君,WANG Hong-jun,ZHANG Pei-jun(北京市農(nóng)林科學(xué)院,畜牧獸醫(yī)研究所,北京,100097) 

刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2007 18(6)  分類號(hào)： Q789 R392  關(guān)鍵詞： 雞傳染性支氣管炎   噬菌體展示肽庫(kù)   抗原表位  

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