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載體介導(dǎo)的人支氣管上皮細胞DNA聚合酶β基因的靶向RNA干擾

時間:2023-04-26 20:30:58 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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載體介導(dǎo)的人支氣管上皮細胞DNA聚合酶β基因的靶向RNA干擾

目的運用載體介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)靶向抑制人DNA聚合酶β基因在支氣管上皮細胞中的表達,為研究DNA聚合酶β在環(huán)境化學(xué)污染物所致DNA損傷修復(fù)中的功能和機制作準備.方法利用分子克隆技術(shù)構(gòu)建含pU6啟動子的人DNA聚合酶β基因RNA干擾特異性綠色熒光蛋白C1載體重組子"pEGFP-C1-U6-dsRNA";以脂質(zhì)體法將載體重組子轉(zhuǎn)染人支氣管上皮細胞,同時以空白細胞和空載體轉(zhuǎn)染細胞作對照;在經(jīng)G418篩選后,以熒光顯微成像技術(shù)觀察細胞的轉(zhuǎn)染效果,以蛋白印跡法分析轉(zhuǎn)染后細胞中的DNA聚合酶β表達情況.結(jié)果在轉(zhuǎn)染重組子的細胞中,DNA聚合酶β的表達明顯下調(diào),僅相當于正常細胞的17.3%.結(jié)論人支氣管上皮細胞DNA聚合酶β基因的靶向抑制成功.

作 者: 胡大林 莊志雄 劉移民 何云 紀衛(wèi)東 方道奎 沙焱 涂曉志 楊建平   作者單位: 中山大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,廣州,510080  刊 名: 衛(wèi)生研究  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH  年,卷(期): 2006 35(2)  分類號: Q555 R994.6  關(guān)鍵詞: 重組載體   RNA干擾   DNA聚合酶β基因  

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