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體外誘導人臍血CD34+細胞向肝細胞的分化
目的探討在體外培養(yǎng)條件下人臍血CD34+細胞向肝細胞的分化.方法用磁性細胞分選試劑盒(MACS)分離出CD34+細胞后在含50 mL/LFBS,1×ITS,4.7 mg/L亞油酸,10-4mol/L2-磷酸抗壞血酸的低糖型DMEM中培養(yǎng),并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg/L)進行誘導.分別于生長因子刺激前和刺激8、16 d時留取細胞.通過RT-PCR對ALB、AFP、GATA-4等mRNA的表達水平進行檢測;用免疫細胞化學染色檢測ALB蛋白的表達,并收集培養(yǎng)液測定ALB的質(zhì)量濃度.結果流式細胞儀檢測結果顯示CD34+細胞的平均分離純度>90%,達到分離要求.RT-PCR檢測到誘導后的CD34+細胞表達ALB、AFP、GATA4 mRNA.免疫細胞化學染色可見誘導16 d的CD34+細胞出現(xiàn)ALB陽性表達細胞,ELISA檢測表明誘導組8、16 d培養(yǎng)液中的ALB質(zhì)量濃度明顯增高,與誘導前和未誘導組相比均有顯著差異(P<0.01).結論在體外培養(yǎng)條件下,臍血CD34+造血干細胞可分化為表達白蛋白的類肝細胞.
作 者: 張芳婷 葉靜 萬匯涓 龍霞 聶李平 于潔 房家智 Zhang Fangting Ye Jing Wan Huijuan Long Xia Nie Liping Yu Jie Fang Jiazhi 作者單位: 北京大學深圳醫(yī)院中心實驗室,深圳,518036 刊 名: 西安交通大學學報(醫(yī)學版) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES) 年,卷(期): 2006 27(2) 分類號: Q254 關鍵詞: 臍血CD34+細胞 肝細胞 分化【體外誘導人臍血CD34+細胞向肝細胞的分化】相關文章:
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