非洲山毛豆葉片蛋白組雙向電泳樣品制備方法的建立

以非洲山毛豆葉片為材料,對非洲山毛豆總蛋白質(zhì)3種提取方法(TCA/丙酮沉淀法、尿素/硫脲法和酚-甲醇/醋酸銨沉淀法)以及3種蛋白裂解液進(jìn)行比較分析.結(jié)果表明,采用酚-甲醇/醋酸銨沉淀法提取非洲山毛豆葉片總蛋白,用蛋白裂解液(7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,4% CHAPS,40 mmol/L Tris-base,1% Bio-Lyte pH3.5-10,65 mmol/L DTT)裂解蛋白1 h,2-DE圖譜分離到的蛋白點(diǎn)效果最好.此方法適合于色素、多酚及黃酮類次生代謝物含量較多的非洲山毛豆葉片總蛋白制備方法.

作 者： 賴多 徐漢虹   作者單位： 華南農(nóng)業(yè)大學(xué),天然農(nóng)藥與化學(xué)生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510642  刊 名： 生物技術(shù)通報(bào)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(4)  分類號：   關(guān)鍵詞： 非洲山毛豆   葉片   蛋白質(zhì)組   雙向電泳   Tephrosia vogelii   Hook f.   Leaf   Proteome   Two-dimensional electrophoresis  

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