牛干擾素單克隆抗體的制備與初步鑒定

通過IPTG誘導的大腸埃希菌表達重組牛干擾素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow親和層析柱進行融合蛋白的純化,純化后的融合蛋白BovIFN-γ作為抗原免疫Balb/c小鼠,經(jīng)5次免疫后,取小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行細胞融合,間接ELISA篩選,有限稀釋法克隆亞克隆獲得分泌BovIFN-γ單克隆抗體的雜交瘤細胞株,并通過ELISA方法對其抗體效價、特異性、亞類及穩(wěn)定性進行鑒定.獲得一株穩(wěn)定分泌BovIFN-γ單克隆抗體的雜交瘤細胞株A12E9,細胞培養(yǎng)上清和腹水效價可達1∶3 200和1∶160 000.

作 者： 李超 林祥梅 余多慰 李全芬 李桂芬 韓雪清   作者單位： 李超,余多慰,李全芬(南京師范大學生命科學學院,江蘇南京,210046)

林祥梅,李桂芬,韓雪清(中國檢驗檢疫科學研究院,北京,100029) 

刊 名： 動物醫(yī)學進展  PKU 英文刊名： PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE  年，卷(期)： 2010 31(4)  分類號： S852.43  關鍵詞： 牛γ干擾素   單克隆抗體   鑒定  

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