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尋常型銀屑病并發(fā)尋常性天皰瘡2例

時間:2021-09-30 19:21:47 醫(yī)學(xué)論文 我要投稿

尋常型銀屑病并發(fā)尋常性天皰瘡2例

 銀屑病中細胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、Fas、bax的檢測  

  

摘要   為了探討細胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、Fas、bax在銀屑病發(fā)病中的意義,采用免疫組化ABC法、SABC法檢測了這幾種基因在15例銀屑病組織中的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)銀屑病的角質(zhì)形成細胞中抑凋亡基因bcl-2幾乎不表達,促凋亡基因Fas、bax陽性表達。提示促凋亡基因Fas、bax在銀屑病中發(fā)病起重要作用,而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。 

關(guān)鍵詞  銀屑病、 bcl-2基因、 Fas基因、 bax基因。

  銀屑病的發(fā)病機理尚不明確,角質(zhì)形成細胞異常增生和角化不全是銀屑病的主要病理改變,以往對這方面的研究主要集中在免疫學(xué)和生化學(xué)方面。近年來銀屑病與細胞凋亡的關(guān)系逐漸受到越來越多學(xué)者的重視。國外有學(xué)者報道銀屑病表皮中角質(zhì)形成細胞凋亡異常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是現(xiàn)今研究較多、較重要的幾個細胞凋亡相關(guān)基因。為了探討這幾種基因在銀屑病發(fā)病中的意義,我們采用免疫組化方法檢測了銀屑病中細胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、Fas及bax。

1 材料和方法

  1.1標本來源:采用1994-1997年我院保存的石蠟包埋組織塊。尋常型銀屑病15例,其中男8例,女例;年齡11-68歲,平均年齡 29.13歲;均為進行期銀屑病。6名正常人皮膚組織,皆取自皮膚外科行重瞼術(shù)、面部美容切除術(shù)者的皮膚,石蠟包埋作為對照組。測定前先將石蠟包埋組織塊作常規(guī)組織切片及HE染色,在光鏡下核對診斷,證實其病理診斷無誤方采用。

  1.2試劑:鼠抗人bcl-2單克隆抗體購自Dako公司,生物素化羊抗鼠單克隆抗體系華美生物制品公司產(chǎn)品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及鏈酶親和素-生物素-過氧化酶復(fù)合物免疫組化試劑盒(簡稱SABC試劑盒)均購自武漢博士德生物工程公司。   

  1.3方法:載玻片用APES處理后干燥備用,切取4-5μm厚的石蠟切片,常規(guī)脫蠟水化。Bcl-2基因的檢測參照ABC法稍加改進,陽性對照為正常淋巴結(jié),陰性對照為不加一抗。Fas、bax基因的檢測采用SABC法,陽性對照分別為武漢博士德生物工程公司提供的Fas、bax基因陽性對照片,陰性對照為不加一抗。 

  1.4判斷:顯微鏡下觀察,棕黃色為陽性結(jié)果。陽性強度判斷標準如下:強陽性(+ + +)指50%以上細胞陽性染色;中等強度陽性(+ +)指25%-50%細胞陽性染色;弱陽性(+)指25%以下細胞陽性染色;陰性(-)指細胞均無任何陽性染色。

2 結(jié)果   6例正常人皮膚組織中:bcl-2基因除部分基底細胞呈陽性反應(yīng)外,余陰性。、Fas和bax基因為陰性表達。15例銀屑病組織中:bcl-2基因在15例表皮增生的角質(zhì)形成細胞中均呈陰性表達,但14例部分基底細胞和浸潤的淋巴細胞呈陽性染色;Fas基因在12例銀屑病組織中呈陽性表達;bax基因在13例中呈陽性

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