細菌的鑒定

時間：2023-05-06 08:46:33 鑒定材料我要投稿

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細菌的鑒定

細菌的鑒定介紹：

細菌的鑒定是對細菌進行各方面的檢查。例如：細菌對于碳水化合物的代謝試驗、吲哚試驗、淀粉的水解等各種試驗。

細菌的鑒定正常值：

胃腸道的正常菌群可分為需氧菌、兼性厭氧菌和厭氧菌。最居優(yōu)勢的是厭氧菌，占菌群總數(shù)的99%，其中僅類桿菌和雙歧桿菌就占90%，而乳桿菌和雙歧桿菌可與我們終生相隨。這些正常菌群的種類以及比例均正常。

細菌的鑒定臨床意義：

有些細菌可以分解色氨酸生成吲哚可以與二甲基氨基苯甲醛反應(yīng)生成紅色的玫瑰吲哚，因此可根據(jù)細菌能否分解色氨酸產(chǎn)生吲哚來鑒定菌種。

異常結(jié)果：1. 腸道的內(nèi)環(huán)境不處于動態(tài)平衡，正常細菌的比例失調(diào)。痛、胃酸、胃脹、腹瀉、腹痛、下墜、膿血便等癥狀，嚴重時還會引起消化道出血、穿孔、誘發(fā)癌變，如胃癌、結(jié)腸癌等。 2. 埃希氏菌引起腸道外感染，特別是泌尿道感染。枸櫞酸桿菌屬引起原發(fā)性枸櫞酸桿菌肺炎或繼發(fā)性枸櫞酸桿菌肺炎。病理改變主要表現(xiàn)為支氣管肺炎，可有肺泡壁破壞形成小膿腫及局灶性出血�？死撞鷮僖鸬暮粑栏腥� 、敗血癥、化膿性腦膜炎、尿路感染等臨床癥狀。還有沙門菌屬、變形桿菌屬等引起的各種異常癥狀。3. 某些細菌水解淀粉并利用其水解產(chǎn)物，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣導(dǎo)致人體的不適。

需要檢查的人群：有消化道出血、穿孔、誘發(fā)癌變等各種細菌感染癥狀者。

細菌的鑒定注意事項：

不合宜人群：暫時不明

檢查前禁忌：要保持良好的作息習(xí)慣，注意正常的飲食習(xí)慣。

檢查時要求：積極配合醫(yī)生

細菌的鑒定檢查過程：

一. 吲哚試驗

方法：以接種環(huán)接種待試細菌的新鮮斜面培養(yǎng)物于鄧亨氏蛋白胨溶液中， 37℃培養(yǎng)24～48小時后(可延長4～5天)。于培養(yǎng)液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，搖勻，靜置片刻后，沿試管壁加入試劑2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液體變紅色者為陽性反應(yīng)。

也可將一指頭大的脫脂棉，滴上兩滴歐立希氏試劑，再在同處加滴兩滴高硫酸鉀(K2S2O4)飽和水溶液，置于含培養(yǎng)液的被檢試管中，離液面約半寸，置燒杯內(nèi)水浴煮沸為止，脫脂棉上出現(xiàn)紅色為陽性。此法略繁，但省試劑且準確，因為將試劑加到液體中，吲哚和糞臭素均呈陽性，而用此法，只是吲哚(它能揮發(fā))呈陽性反應(yīng)。

亦可以濾紙片浸濕1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%濃HCl溶液，然后以接種環(huán)刮取一環(huán)瓊脂的純培養(yǎng)物涂布于該濾紙上。

細菌涂印周圍呈藍色者為陽性，細菌涂印周圍無色澤變化或淡黃色者為陰性。

二. 淀粉的水解

淀粉在酸的催化作用下，能發(fā)生水解;淀粉的水解過程：先生成分子量較小的糊精(淀粉不完全水解的產(chǎn)物)，糊精繼續(xù)水解生成麥芽糖，最終水解產(chǎn)物是葡萄糖。

對劑：碘化鉀 2g 蒸餾水 300ml

培養(yǎng)基：將細菌接種在平板上，置37度溫箱中培養(yǎng)24h，加革蘭氏碘液于菌落上，觀察顏色變化，呈藍色者為陰性，無藍色為陽性。

三. β-半乳糖苷酶試驗

試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液(6.9g NaH2P04溶于45ml蒸餾水中，用30% NaOH調(diào)整pH為7.0，再加水至50ml)5ml，置4℃冰箱中保存。

方法：取純菌落用無菌生理鹽水制成濃的菌懸液，加入0.25ml ONPG液，置35℃水浴20min至3h，觀察結(jié)果。

結(jié)果判定：通常在20～30min內(nèi)顯色。出現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng)。

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