微生物實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)短心得體會(huì)
當(dāng)我們受到啟發(fā)，對(duì)學(xué)習(xí)和工作生活有了新的看法時(shí)，心得體會(huì)是很好的記錄方式，這樣我們就可以提高對(duì)思維的訓(xùn)練。那么心得體會(huì)該怎么寫？想必這讓大家都很苦惱吧，下面是小編為大家收集的微生物實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)短心得體會(huì)，僅供參考，大家一起來(lái)看看吧。
微生物實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)短心得體會(huì)1
本學(xué)期已臨近尾聲，我們即將告別微生物實(shí)驗(yàn)這門課程，在這一學(xué)期，八個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)中，我們學(xué)到了許多知識(shí)，這些知識(shí)將會(huì)陪伴我們一生，下面我們就來(lái)通過(guò)一些實(shí)驗(yàn)來(lái)回顧一下本學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)。
我選取的實(shí)驗(yàn)是《環(huán)境因素對(duì)微生物的影響》，之所以選擇這則實(shí)驗(yàn)是因?yàn)檫@則實(shí)驗(yàn)比較簡(jiǎn)單，而且涉及面非常多。首先我們來(lái)分析一下這則實(shí)驗(yàn)所涉及到的知識(shí)面。環(huán)境對(duì)微生物生長(zhǎng)影響主要分以下幾種溫度：通過(guò)影響蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)入細(xì)胞膜的流動(dòng)性及完整性來(lái)影響微生物的生長(zhǎng)、繁殖和新陳代謝。微生物群體生長(zhǎng)、繁殖最快的溫度為其最適生長(zhǎng)溫度。
PH：H+影響菌體細(xì)胞質(zhì)膜上電荷性質(zhì)，微生物吸收物質(zhì)變化，影響代謝，高濃度H+或引起菌體表而蛋白質(zhì)和核酸水解以及影響酶和活性.滲透壓：微生物在等滲溶液中可正常生長(zhǎng)繁殖；在高滲溶液中細(xì)胞失水，生長(zhǎng)受到抑制；在低滲溶液中，細(xì)胞吸水膨脹，因?yàn)榇蠖鄶?shù)微生物具有較為堅(jiān)韌的細(xì)胞壁，細(xì)胞一般不會(huì)裂解，可以正常生長(zhǎng)，但低滲溶液中溶質(zhì)含量低，在某些情況下也會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)。
抗生素：在自然界中普遍存在微生物間的拮抗作用，許多微生物可以產(chǎn)生抗生素，能選擇性的抑制或殺死其他微生物。
微生物的實(shí)驗(yàn)其實(shí)簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)步驟幾乎相同：制作培養(yǎng)基、倒平板、接種微生物、培養(yǎng)、觀察菌種生長(zhǎng)情況從而得出結(jié)論。本次實(shí)驗(yàn)也是這樣首先制作培養(yǎng)基，在進(jìn)行倒平板步驟時(shí)，對(duì)平板環(huán)境進(jìn)行區(qū)分，然后進(jìn)行接種。
在進(jìn)行倒平板的時(shí)候，要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行倒置，同時(shí)也要保持平板的厚度均勻。
在進(jìn)行菌種接種的時(shí)候，選擇合適的劃線方式，一般是選擇Z字形劃線法，注意不要把平板弄破，等到平板凝固后才可以進(jìn)行接種。接種時(shí)也要注意在無(wú)菌條件下接種。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，再觀察最后得出結(jié)論。
通過(guò)一學(xué)期的實(shí)驗(yàn)，我越發(fā)的明白實(shí)驗(yàn)操作對(duì)于結(jié)果的重要性。實(shí)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)操作可以說(shuō)是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵部分，可是馬虎不得。對(duì)于需要團(tuán)隊(duì)合作的實(shí)驗(yàn)，個(gè)人認(rèn)為要有強(qiáng)勢(shì)的人員搭檔，不說(shuō)是精通實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程，最少也得知道實(shí)驗(yàn)的基本操作，掌握要做實(shí)驗(yàn)的操作方法，這對(duì)于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)無(wú)疑是與決定性作用的。對(duì)于個(gè)人的實(shí)驗(yàn)?zāi)芰�，關(guān)鍵還是要看平時(shí)的積累，有些實(shí)驗(yàn)操作繁瑣復(fù)雜，需要極大的耐心，這些都應(yīng)該是逐漸培養(yǎng)起來(lái)的。最后，簡(jiǎn)單談一下自己在微生物實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)的心得體會(huì)。剛開(kāi)始的時(shí)候，最令我頭痛的就是培養(yǎng)基的配制、消毒滅菌，培養(yǎng)基的配制和消毒與滅菌兩個(gè)實(shí)驗(yàn)可以說(shuō)是微生物實(shí)驗(yàn)的最近本課程，內(nèi)容有配制培養(yǎng)基、分裝培養(yǎng)基、為下次試驗(yàn)準(zhǔn)備菌種及無(wú)菌器材等，內(nèi)容顯得非常繁多緊湊，需要準(zhǔn)備的器材、藥品及用具較多、較雜、較細(xì)。
最后只能是提前參照微生物實(shí)驗(yàn)教材，將實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所涉及到的藥品、器材及儀器等統(tǒng)統(tǒng)羅列出來(lái)，計(jì)算出實(shí)驗(yàn)時(shí)大小材料需用的數(shù)量，這樣，一方面可以有效避免在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)遺忘相關(guān)物品，另一方面也可為以后同一實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作提供依據(jù)，使實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作逐步趨于程序化，從而在有效低實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作量的同時(shí)，最大限度地提高準(zhǔn)備效率。還有一點(diǎn)很重要，在科研型實(shí)驗(yàn)室里就不能不說(shuō)導(dǎo)師和師兄師姐，其實(shí)他們才是最具價(jià)值的“活文獻(xiàn)”，他們就是實(shí)驗(yàn)室里的參考文獻(xiàn)，活參考書。生物就是一門實(shí)驗(yàn)的科學(xué)，其中科研經(jīng)驗(yàn)的積累就是一個(gè)非常重要的組成部分，導(dǎo)師和師兄師姐的一句話往往可以事半功倍，大幅提高實(shí)驗(yàn)的成功率和效率�？傊瑸榱吮ＷC實(shí)驗(yàn)過(guò)程高質(zhì)高量完成，除了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)過(guò)程外，還要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員必須具備相應(yīng)的素質(zhì)，實(shí)驗(yàn)操作人員必須具備較扎實(shí)的專業(yè)基礎(chǔ)、熟練的實(shí)驗(yàn)技能及高度的責(zé)任心，在工作中要善于總結(jié)，同時(shí)還要和理論課老師積極溝通，這樣才能夠真正的`學(xué)好微生物實(shí)驗(yàn)這門課程。
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這學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)結(jié)束，這是我第一次接觸到微生物的世界中，以前也只是在書本中學(xué)習(xí)，但是真正走進(jìn)它們的世界中是通過(guò)這個(gè)課程開(kāi)始的。在開(kāi)始微生物實(shí)驗(yàn)之前我是以為這個(gè)實(shí)驗(yàn)不會(huì)很難，但是通過(guò)本學(xué)期的學(xué)習(xí)發(fā)現(xiàn)這個(gè)課程真的很難。你不僅需要理論知識(shí)作為鋪墊，你還需要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)精神。
第一節(jié)課老師給我們介紹了我們本學(xué)期微生物實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)和報(bào)告的要求，也讓我們了解了微生物實(shí)驗(yàn)和以往其他實(shí)驗(yàn)的不同。實(shí)驗(yàn)步驟雖然很簡(jiǎn)單，但是往往一個(gè)微小的細(xì)節(jié)處理不當(dāng)也會(huì)導(dǎo)致你整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的失敗。這個(gè)我真的深有體會(huì)，我們小組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都很不理想。實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)難也不難，其實(shí)無(wú)非是先對(duì)配置培養(yǎng)液，然后對(duì)清洗干凈的試管、培養(yǎng)皿以及配置好的培養(yǎng)液進(jìn)行滅菌，等滅菌完了就放入無(wú)菌室進(jìn)行細(xì)菌的接種，最后將接種好細(xì)菌和培養(yǎng)液的培養(yǎng)皿放進(jìn)恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)�？此坪芎�(jiǎn)單的操作過(guò)程我卻狀況百出。我總結(jié)了幾點(diǎn)導(dǎo)致這么多次實(shí)驗(yàn)失敗的地方。第一是操作不夠規(guī)范，在培養(yǎng)皿中倒入培養(yǎng)液后沒(méi)有搖勻?qū)е屡囵B(yǎng)基邊緣開(kāi)裂，未等瓊脂培養(yǎng)液凝固就倒置導(dǎo)致培養(yǎng)基分布不均勻。第二是理論知識(shí)欠缺，沒(méi)有等培養(yǎng)液冷卻至40到50攝氏度就倒入培養(yǎng)基然后馬上就接種了細(xì)菌，導(dǎo)致細(xì)菌已經(jīng)被燙死。
好在值得欣慰的是最后一個(gè)自主實(shí)驗(yàn)還是比較成功的。試驗(yàn)以環(huán)境對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響為題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，我們小組通過(guò)PH值，溫度，紫外線照射三個(gè)方面進(jìn)行研究，結(jié)果很滿意，很明顯。大腸桿菌在PH值為7時(shí)生長(zhǎng)最適，在溫度為37℃時(shí)生長(zhǎng)最佳，紫外線會(huì)抑制其生長(zhǎng)。
不得不承認(rèn)，通過(guò)這次實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)，我們學(xué)到了很多，得到了很多，有些是書本上學(xué)不到的，只有自己參與了，操作了，才會(huì)知道。也要感謝老師對(duì)我們的照顧。
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1微生物區(qū)系分析方法
分別在茯茶“發(fā)花”不同階段取樣，采用稀釋涂布平板法，對(duì)樣品中的微生物進(jìn)行分離、純化和計(jì)數(shù)。
1.1分離培養(yǎng)基
細(xì)菌分離：
采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、瓊脂20g、蒸餾水lO00mL。將上述成分溶解定容，調(diào)pH7.2～7.4，分裝，12l℃滅菌20min。倒平板前按50μg/ml的量加入用乙醇溶解的制霉菌素或放線菌酮（起抑制霉菌的作用）。酵母菌分離：采用YPD培養(yǎng)基：葡萄糖20g、蛋白胨10g、酵母膏10g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml、pH自然，113℃滅菌30min。
霉菌分離：
采用PDA培養(yǎng)基：稱取200g馬鈴薯，洗凈去皮切碎，加水1000mL煮沸半個(gè)小時(shí)，紗布過(guò)濾，定容至1000mL，添加20g葡萄糖和17-20g瓊脂并定容至1000mL，121℃滅菌20min。等降溫至55℃左右時(shí)，加入氨芐青霉素（或鏈霉素）50μg/ml(真菌分離計(jì)數(shù)時(shí)用以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng))。或者加入氯霉素或慶大霉素滅菌之前加入。
放線菌分離：
采用高氏一號(hào)培養(yǎng)基：可溶性淀粉20g、氯化鈉0.5g、硝酸鉀lg、磷酸氫二鉀0.5g、硫酸鎂0.5g、硫酸亞鐵0.01g、瓊脂18～20g、蒸餾水1000ml、pH7.2～7.4，121℃滅菌20min。可在盛無(wú)菌水的三角瓶中加10滴100g/l的石炭酸（苯酚）溶液和50μg/ml的制霉菌素以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。
察氏培養(yǎng)基(1L)：葡萄糖30g；MgSO4·7H2O0.5g；NaNO33.0g；KCl0.5g；FeSO4·7H2O0.01g；K2HPO41.0g；瓊脂20g(觀察霉菌形態(tài)用)，如要分離用需要滅菌后加30U/mL鏈霉素)。
其他鑒定用培養(yǎng)基成分及配方參照周德慶《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》
1.2計(jì)數(shù)方法
計(jì)數(shù)方法參照GB/T4789.2-2003《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定》的測(cè)定方法。
1.3取樣：每隔2天取一次樣，每個(gè)樣至少做1次重復(fù)，總共取7次樣，為了減少誤差，盡量取同一批樣。盡量保證茯磚茶中微生物種類和數(shù)量不發(fā)生較大變化，樣品取回后立即進(jìn)行微生物分離計(jì)數(shù)。在取樣時(shí)要測(cè)定發(fā)花環(huán)境（烘房）里的溫度、濕度，取回樣品后，要測(cè)定茶樣的含水量和pH值。其余不做微生物分析的茶樣應(yīng)立即放在-20℃的冰箱里低溫保存。
pH值的測(cè)定：準(zhǔn)確稱取2.00g茶樣，加50ml蒸餾水，置于150ml三角瓶中，在振蕩器上振蕩浸提20分鐘，過(guò)濾，濾液置于100毫升燒杯中，然后用通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)pH溶液校正后的Backman電子酸度計(jì)，測(cè)定浸提液的pH值，每個(gè)試樣重復(fù)兩次。
1.4分離、純化茯磚茶中的微生物
菌種分離：以無(wú)菌操作分別稱取試樣25克，投入盛有玻璃珠及225ml滅菌生理鹽水的500ml三角瓶?jī)?nèi)，振蕩20min，用無(wú)菌移液管吸取1ml菌懸液，加到9ml的無(wú)菌水中，然后依次制成10-2，10-3，10-4，10-5，10-6，10-7，10-8等7個(gè)濃度梯度的菌懸液，用無(wú)菌移液管吸取1ml緩緩注入平板培養(yǎng)基內(nèi)，稀釋涂布平板培養(yǎng)微生物，密封置于28℃條件下培養(yǎng)，4～5d后菌落長(zhǎng)滿整個(gè)平板。
菌種純化：根據(jù)初分菌落的形態(tài)特征，用接種針挑取各菌落的少量菌絲體，接種在事先準(zhǔn)備好的PDA瓊脂培養(yǎng)基上(每平板內(nèi)接種3個(gè)菌落)，進(jìn)行劃線平板培養(yǎng)，菌絲體生長(zhǎng)1周后，根據(jù)長(zhǎng)出的各菌落特點(diǎn)進(jìn)行篩選和純化，如此反復(fù)，直至菌落的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)特征均表現(xiàn)一致時(shí)視為單一菌種的菌落。
1.5鑒定微生物的種類
借助菌落結(jié)構(gòu)和顯微鏡觀察初步判斷微生物的種類，如要進(jìn)一步鑒定，可通過(guò)微生物的生理生化反應(yīng)和分子生物學(xué)深入鑒定。
2微生物的分類檢索鑒定方法
2.1細(xì)菌鑒定
細(xì)菌鑒定參照《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》(第八版)、《一般細(xì)菌常用鑒定方法》、《常用細(xì)菌鑒定手冊(cè)》作形態(tài)觀察和相關(guān)的生理生化試驗(yàn)。(1)形態(tài)觀察：個(gè)體形態(tài)觀察：在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、大�。痪湫螒B(tài)觀察：觀察菌落形狀、大小、邊緣、表面、隆起形狀、透明度及培養(yǎng)基的顏色等。，(2)染色：革蘭氏染色法、芽孢染色法等。(3)生理生化及生態(tài)特征鑒定；過(guò)氧化氫酶的測(cè)定、氧化酶的測(cè)定、好氧性測(cè)定、糖或醇類發(fā)酵試驗(yàn)、葡萄糖酸鹽的氧化試驗(yàn)、V.P試驗(yàn)(乙酰甲基甲醇試驗(yàn))、淀粉水解試驗(yàn)、明膠水解試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)、產(chǎn)生吲哚試驗(yàn)、H2S產(chǎn)生試驗(yàn)、石蕊牛奶試驗(yàn)、酪氨酸水解試驗(yàn)、精氨酸利用實(shí)驗(yàn)、檸檬酸鹽或丙酸鹽的利用試驗(yàn)、pH生長(zhǎng)試驗(yàn)、生長(zhǎng)溫度的測(cè)定以及耐鹽性試驗(yàn)等。
2.2酵母菌鑒定
酵母菌鑒定參照《酵母菌的特征與鑒定手冊(cè)》和《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》對(duì)分離得到的酵母菌進(jìn)行形態(tài)觀察和相關(guān)的生理生化試驗(yàn)。(1)形態(tài)觀察：個(gè)體形態(tài)觀察：無(wú)絲營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的顯微鏡觀察、擲孢子的形成和形態(tài)觀察、子囊孢子的顯微鏡觀察。菌落形態(tài)觀察。
（2）染色：美蘭染色法。
�。�3）生理生化及生態(tài)特征鑒定：碳源同化試驗(yàn)、氮源同化試驗(yàn)、糖類發(fā)酵試驗(yàn)、產(chǎn)生類淀粉化合物的測(cè)定、在60%(w/w)葡萄糖-酵母膏中生長(zhǎng)測(cè)試、在37℃下做生長(zhǎng)溫度的測(cè)定、脲酶試驗(yàn)等。
2.3霉菌鑒定
參照《真菌的形態(tài)與分類》和《真菌鑒定手冊(cè)》等相關(guān)文獻(xiàn)，做相關(guān)的生理生化試驗(yàn)和形態(tài)觀察。形態(tài)觀察包括：
�。�1）菌落形態(tài)觀察：顏色、大小、表明特征、質(zhì)地等。（2）個(gè)體形態(tài)觀察：菌絲、子實(shí)體、孢子的形態(tài)等。
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